[发明专利]用胶体金免疫层析试检测玉米赤霉烯酮毒素的方法无效
申请号: | 200910307803.0 | 申请日: | 2009-09-27 |
公开(公告)号: | CN101650368A | 公开(公告)日: | 2010-02-17 |
发明(设计)人: | 严亚贤;王元凯;王君;孙建和 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577 |
代理公司: | 上海交达专利事务所 | 代理人: | 王锡麟;王桂忠 |
地址: | 200240*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 一种检测技术领域的用胶体金免疫层析试检测玉米赤霉烯酮毒素的方法,包括如下步骤:将ZEN半抗原通过活泼酯法分别与BSA和OVA偶联,得到ZEN的偶联物ZEN-BSA和ZEN-OVA;利用ZEN-BSA作为免疫原,采用常规方法制备抗ZEN的单克隆抗体;用柠檬酸三钠还原法制备40nm的胶体金,用该胶体金标记经过透析除盐处理的抗ZEN的单克隆抗体;将步骤三所得的已标记的单克隆抗体喷涂到金标垫上,将ZEN-OVA喷涂到T线,兔抗鼠的单克隆抗体喷涂到C线,组装成试纸条,干燥;将待测样品用甲醇提取,离心,取上清,将上清滴入试纸条的样本槽中,获取T线和C线的显色,鉴定,得到结果。本发明可特异性检测ZEN毒素,准确率高,检测速度快,所需时间仅为5~10分钟。 | ||
搜索关键词: | 胶体 免疫 层析 检测 玉米 赤霉烯酮 毒素 方法 | ||
【主权项】:
1、一种用胶体金免疫层析试检测玉米赤霉烯酮毒素的方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤一,将ZEN半抗原通过活泼酯法分别与BSA和OVA偶联,得到ZEN的偶联物ZEN-BSA和ZEN-OVA;步骤二,利用ZEN-BSA作为免疫原,采用常规方法制备抗ZEN的单克隆抗体;步骤三,用柠檬酸三钠还原法制备40nm的胶体金,用该胶体金标记经过透析除盐处理的抗ZEN的单克隆抗体;步骤四,将步骤三所得的已标记的单克隆抗体喷涂到金标垫上,将ZEN-OVA喷涂到T线,兔抗鼠的单克隆抗体喷涂到C线,组装成试纸条,干燥;步骤五,将待测样品用甲醇提取,离心,取上清,将上清滴入试纸条的样本槽中,获取T线和C线的显色,鉴定,得到结果。
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