[发明专利]一种检测不同亚型禽流感病毒的方法及其专用试剂盒

摘要

本发明公开了一种检测不同亚型禽流感病毒的方法及其专用试剂盒。本发明的方法包括如下步骤：将待测生物样本的cDNA作为模板，用引物对A和引物对B进行多重PCR，将多重PCR的产物进行琼脂糖凝胶电泳，用荧光成像分析仪分别在532nm和635nm下进行凝胶扫描分析；如果635nm下具有荧光条带，待测生物样本含有H3亚型禽流感病毒；如果532nm下具有荧光条带，待测生物样本含有H6亚型禽流感病毒；引物对A是序列表的序列11和序列表的序列12所示核苷酸组成的引物对，序列12所示核苷酸的5′端用Tamra标记；引物对B是序列表的序列3和序列表的序列4所示核苷酸组成的引物对，序列4所示核苷酸的5′端用Cy5标记。本发明的方法具有高通量性、高分辨性、可操作性强、适用范围广、省时、节省试验耗材和安全等优点。

主权项

一种检测待测生物样本中是否含有DNA片段甲和/或DNA片段乙的双色荧光多重PCR方法，包括如下步骤：将待测生物样本的总DNA作为模板，用引物对甲和引物对乙进行多重PCR；将多重PCR的产物进行琼脂糖凝胶电泳，用荧光成像分析仪分别在532nm和635nm下进行凝胶扫描分析；如果635nm下具有荧光条带，待测生物样本中含有DNA片段乙，如果532nm下具有荧光条带，待测生物样本中含有DNA片段甲；引物对甲的5’端用Tamra标记，引物对乙的5’端用Cy5标记；所述引物对甲用于扩增DNA片段甲；所述引物对乙用于扩增DNA片段乙。