[发明专利]一种单克隆抗体制备方法及其应用无效
申请号: | 200810207890.8 | 申请日: | 2008-12-26 |
公开(公告)号: | CN101762704A | 公开(公告)日: | 2010-06-30 |
发明(设计)人: | 穆海东;汪宁梅;穆宇豪;刘纲;李湖丹 | 申请(专利权)人: | 上海裕隆生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;C07K16/18 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 200233 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种针对筛选克隆化步骤进行改进的新的单克隆抗体制备方法。使用该方法由于在ELISA筛选阳性克隆株的包被过程中,除了一般用预定抗原进行ELISA筛选阳性克隆株的步骤外,加入了与包被抗原有相近抗体结合位点的多个抗原进行ELISA筛选的步骤,排除了特异性不高的阳性克隆株;从而使最终得到的单克隆抗体特异性增强,大大减少制备抗体在使用过程中出现的交叉反应。本发明还公开了利用该方法进行cTnI的制备,包括用含有Myo、FABP、CK-MB、CRP、NTB五种抗原的混合蛋白溶液进行阳性克隆株的筛选。 | ||
搜索关键词: | 一种 单克隆抗体 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】:
一种单克隆抗体制备方法,包括筛选克隆化过程,其特征在于,所述的筛选克隆化过程,包括两个部分:包被过程1:用预定抗原包被ELISA板条,通过反应和ELISA检测后,筛选得到OD值(450nm,630nm双波长检测得到的吸光度值)>1的阳性克隆株;包被过程2:用与预定抗原有相近抗体结合位点的多种抗原对阳性克隆株进行筛选,通过反应和ELISA检测,排除OD值>0.3的克隆株;上述两个包被步骤的使用顺序不限。
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