[发明专利]一枝蒿多倍体的诱导方法

摘要

本发明涉及一种一枝蒿多倍体的诱导方法，是在离体培养下诱导一枝蒿多倍体的方法，该方法提供了多倍体诱导有效的秋水仙素浓度和处理时间组合、形态学鉴定方法、染色体压片方法和气孔鉴定方法。通过本发明可以有效地诱导和筛选出新疆一枝蒿多倍体，有助于克服新疆一枝蒿在长期种植中出现的品种退化问题，对扩大新疆特有经济类作物种植面积、提高新疆一枝蒿种植收入和推广常用中药开发利用有重要意义。

主权项

1、一种一枝蒿多倍体诱导方法，其特征在于按下列步骤进行：a、切除一枝蒿无菌苗的叶片和根，剩下的茎段接种到芽增殖培养基MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L上启动侧芽的萌发，置于温度25℃，光照强度20001x，光照时间16h/d进行培养4d；b、将步骤a中培养的茎段浸泡在含有2％二甲基亚砜和0—2000mg/L秋水仙素的溶液中，置于转速为50r/min摇床上浸泡10—75h；c、将步骤b中茎段分别用无菌水冲洗3次后，放在无菌的滤纸上晾干3min后转入芽增殖培养基MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L中培养30d；d、将步骤c中的茎段上长大的侧芽切下，再转接到MS培养基中诱导生根；e、一枝蒿多倍体筛选：按常规的形态学筛选方法确定疑似株；f、一枝蒿多倍体鉴定：取疑似株幼嫩根尖或茎尖组织，经过8-羟基喹啉预处理1-6h，卡诺固定液固定24h，1mol/L盐酸60℃解离5—12min，改良苯酚品红染色液染色30min，压片观察统计根尖或茎尖染色体，确定多倍体植株。