[发明专利]一种链球菌特异性噬菌体裂解酶的生产方法无效
| 申请号： | 200810061587.1 | 申请日： | 2008-05-07 |
| 公开（公告）号： | CN101275146A | 公开（公告）日： | 2008-10-01 |
| 发明（设计）人： | 陈蔚青;张德勇;陆胤;陈虹;柯薇;张建芬;胡文浪;朱成钢 | 申请（专利权）人： | 浙江树人大学 |
| 主分类号： | C12N15/60 | 分类号： | C12N15/60;C12N15/70;C12N9/88 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 | 代理人： | 张法高 |
| 地址： | 310015浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种链球菌特异性噬菌体裂解酶的生产方法。该裂解酶由重链(约50kDa/条)PlyCA、轻链(约8kDa/条)PlyCB以1∶8的比例构成，其基因名称为PlyC，具有下述核苷酸序列：序列表中PlyCA(序列1)和PlyCB(序列3)的DNA序列，两者分别编码了序列表中PlyCA的氨基酸序列(序列2)和PlyCB的氨基酸序列(序列4)。本发明采用大肠杆菌表达体系，分别构建含裂解酶重链和轻链基因PlyCA和PlyCB的重组质粒，转化至BL21(DE3)细胞，发酵培养工程菌，使PlyCA和PlyCB得到高效表达。表达产物经纯化、复性，获得了链球菌噬菌体裂解酶PlyC。本发明的生产方法与常规方法相比，具有生产成本低廉、产物复性率高、产物活性强、生产方法安全、可满足大规模生产的优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 链球菌 特异性 噬菌体 裂解 生产 方法 | ||
【主权项】：
1.一种链球菌特异性噬菌体裂解酶的生产方法，其特征在于包括如下步骤：1)扩增如下核苷酸序列所述的链球菌特异性噬菌体裂解酶PlyC的基因PlyCA和PlyCB，序列表中PlyCA和PlyCB的DNA序列，其分别编码了PlyCA和PlyCB的氨基酸序列。2)构建PlyCA和PlyCB的重组表达载体；3)将重组表达载体分别转入宿主细胞，获得表达链球菌噬菌体裂解酶PlyC重链PlyCA和轻链PlyCB的工程菌；4)发酵培养表达链球菌噬菌体裂解酶PlyC的重链PlyCA和轻链PlyCB的工程菌，诱导表达获得重组基因表达产物；5)将上述重组基因表达产物，经纯化分离、复性，得到链球菌特异性噬菌体裂解酶PlyC。
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