[发明专利]快速检测尿液中大肠杆菌的方法无效
| 申请号： | 200810047594.6 | 申请日： | 2008-05-06 |
| 公开（公告）号： | CN101275159A | 公开（公告）日： | 2008-10-01 |
| 发明（设计）人： | 李艳;潘小平;王明 | 申请（专利权）人： | 武汉大学 |
| 主分类号： | C12Q1/04 | 分类号： | C12Q1/04;G01N21/64 |
| 代理公司： | 武汉天力专利事务所 | 代理人： | 程祥;冯卫平 |
| 地址： | 43007*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种快速检测尿液中大肠杆菌的方法：用无菌尿杯收集尿液，然后从中取尿液1.0～2.0ml于EP管，2000～3500rpm离心2～4min，取上清400～800μl转至另一EP管，10000～15000rpm离心至少5min，弃上清，吸取100～200μl尿沉渣涂片2张，固定后，一张玻片上加入浓度为2～10ng/μl的探针30～50μl，另一张玻片上加入浓度为1ng/μl的探针，然后在45℃～55℃条件下避光杂交30～45min，清洗后，置于洗涤液中浸泡10～20min，清洗，干燥后，置荧光显微镜下观察结果。本发明所采用的方法十分敏感，最低检出限达到了103～104CFU/ml。本发明所采用的方法特异性强，特异性进达到100％。其理论基础主要是基于成熟的细菌遗传学原理。本发明一份临床标本的检测时间约为1h，耗时较传统培养鉴定方法大为缩短。 | ||
| 搜索关键词： | 快速 检测 尿液 大肠杆菌 方法 | ||
【主权项】：
1.快速检测尿液中大肠杆菌的方法，其特征在于：用无菌尿杯收集尿液，然后从中取尿液1.0～2.0ml于EP管，2000～3500rpm离心2～4min，取上清400～800μl转至另一EP管，10000～15000rpm离心至少5min，弃上清，吸取100～200μl尿沉渣涂片2张，固定后，一张玻片上加入浓度为2～10ng/μl的探针30～50μl，另一张玻片上加入浓度为1ng/μl的探针，然后在45℃～55℃条件下避光杂交30～45min，清洗后，置于洗涤液中浸泡10～20min，清洗，干燥后，置荧光显微镜下观察结果。
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