[发明专利]大白栓菌的人工培养方法及用途

摘要

一种大白栓菌的人工培养方法及用途，本发明通过菌种的纯化，分别以固体培养基和液体培养基对大白栓菌进行培养，得到人工培养大白栓菌。本发明可实现大白栓菌大规模人工培养；以大白栓菌或其提取物为主的药物具有较好的提高免疫力、并具有抗的肿瘤的作用，通过本发明得到的大白栓菌也可作为一种添加剂加入饲料中畜禽生长，增强其免疫力，减少疾病。

主权项

1、一种大白栓菌的人工培养方法，其特征在于：菌种的纯化a、培养基配制：先将梨木屑用水加热提取得梨木汁，将玉米粉、石膏和白糖以按35g∶2g∶1g混匀，然后加入梨木汁700ml，即每700ml梨木汁中混合有玉米粉35g、石膏2g和白糖1g；再加入物料重量2％琼脂，搅拌均匀后加热至沸，0.1-0.15MPa蒸汽高压灭菌30min；b、平板的制作及接种：培养皿各趁热倒入培养基，冷却后即得平板，于无菌操作台上进行接种，将野生大白栓菌菌丝放到75％酒精中冲洗，然后剪碎放入装有无菌水的小三角瓶中，充分摇匀制成孢子悬浮液后涂布到平板上；c、菌体培养：置28℃恒温培养箱中培养120h，培养皿中分别长出了2-4个菌落，通过电子显微镜镜检，确定了大白栓菌；d、菌种的斜面保藏：向玻璃试管中趁热倒入培养基，包扎平放，冷却后即成斜面；c步骤中培养皿中的各个菌落于无菌操作台上分别接种到试管中，28℃恒温培养72h，挑选上述生长良好的试管斜面菌种于冰箱中冷冻保藏；固体培养基培养e、固体培养基的制备：以重量份计：梨木屑40-70，玉米粉10-40，石膏1-3和白糖1-3混合制固体培养基，将经过纯化的大白栓菌置于培养基内于28℃恒温培养箱中培养7天。