[发明专利]人纤维蛋白原制剂的制备方法

摘要

一种人纤维蛋白原制剂的制备方法，其特征是制备方法步骤为：(1)融浆；(2)组分I沉淀；(3)组分II沉淀；(4)组分III沉淀；(5)原液制取。本发明的优点是：用该工艺生产出的人纤维蛋白原质量稳定，提高人纤维蛋白原病毒安全性，在原有的S/D法灭活病毒工艺的基础上，增加99.5±0.5℃保温30分钟的干热灭活病毒工艺，以灭活非脂包膜病毒。

主权项

1.一种人纤维蛋白原制剂的制备方法，其特征是制备方法步骤为：(1)融浆：将原料血浆，先用温度低于30℃的75％酒精喷淋，再用温度低于30℃注射用水冲洗尽酒精并吹干，然后将原料血浆破袋后输送到融浆罐，用30～35℃的水进行夹层循环融浆，血浆融化后，及时停止水循环，把血浆温度控制在0～4℃之间，离心分离沉淀，去除沉淀后的血浆输送至反应罐进行提取分离；(2)组分I沉淀：血浆进入反应罐后，计量、启动搅拌并控制血浆的温度在0～1℃之间，滴加缓冲液；控制流速不超过1.0升/分钟，调节pH值为6.80～7.20；加-20℃以下的50％酒精至8％，流速为1.0～1.2升/分，温度控制在-1～-3℃；加完酒精后进行离心，离心得组分I沉淀和组分I 8％上清液，组分I沉淀进行下步工序；(3)组分II沉淀：称出组分I沉淀重量A，根据沉淀的重量配制沉淀溶解液A，将沉淀粉碎后加入10倍沉淀重量的溶解液A，在35～37℃的条件下搅拌溶解约0.5小时，用板框滤器过滤溶解液，过滤时保持流速为1.5～2.0升/分钟，根据滤液的体积，配制含11％Tween80，3.3％磷酸三丁酯的溶液，温度30℃以下，按滤液体积，以每升滤液加100ml比例，在搅拌下以0.5升/分的速度加入滤液中，并在水浴24～26℃的条件下缓慢搅拌保温6小时，以有效灭活脂包膜病毒，保温结束后，把滤液转移至冷操作间，将溶液的温度降至0～1℃之间，继续搅拌30分钟，测定pH值为7.00～7.10，连接离心机离心，控制离心出液的流速为2.5～3.0升/分/台、出液温度为-1～-3℃，离心结束后，称取沉淀重量B；(4)组分III沉淀：根据沉淀的重量B配制沉淀溶解液B，将沉淀粉碎后加入10倍沉淀重量的溶解液B，在35～37℃的条件下搅拌溶解半小时，连接板框滤器过滤溶解液，把滤液转移至冷操作间，将溶液的温度降至0～1℃之间，加入-20℃以下的50％酒精至8％，加完后继续搅拌30分钟，测定pH值为7.00～7.10，开始离心，控制离心出液的流速为2.5～3.0升/分/台、出液温度为-1～3℃，离心结束后，称出沉淀重量C；(5)原液制取：根据沉淀重量C配制溶解液C，将沉淀粉碎后加入4.5～5.5倍重量溶解液C，在35～37℃的条件下搅拌溶解约0.5小时，然后在99.5±5℃温度下，保温30分钟以灭活非脂包膜病毒，过滤溶解液，取过滤液测定蛋白含量，根据测定的蛋白含量，用溶解液C调节蛋白浓度为2.5～3.5％，柠檬酸三钠含量为1.55±0.05％，氯化钠含量为0.85±0.05％，精氨酸盐酸盐含量为4.5±1％，用5％HCI调节pH值为7.0±0.2。