[发明专利]水稻根尖染色体制片方法

摘要

一种水稻根尖染色体制片方法，属于生物技术领域。本发明采用冰水预处理，纤维素酶和果胶酶进行解离，用苯酚品红染色、CarnoyI固定液固定，压片法进行制片。本发明采用纤维素酶和果胶酶进行解离，用压片法进行制片，相对于传统的涂片法具有操作方便镜检容易的优点，相对于传统的压片法具有背景浅，染色体分散的优点。本发明同时解决了目前水稻根尖染色体制片技术操作复杂和染色体难于观察计数的缺点。

主权项

1、一种水稻根尖染色体制片方法，其特征在于，包括如下步骤：第一步，取水稻植株上白色新根；第二步，将第一步白色新根冰水预处理，采用混合酶液进行酶解；第三步，将经第二步处理后的白色新根用蒸馏水清洗，吸水纸吸干，浸入CarnoyI固定液中固定；第四步，将经第三步处理后的白色新根用蒸馏水清洗，醋酸软化；第五步，将第四步处理好的水稻根尖置于载玻片上，切取酶解后出现的缢缩痕之前的根尖部分，用苯酚品红染色；第六步，压片法进行制片：将双面刀片平放于载玻片上，使双面刀片的边缘与根尖靠近，将盖玻片同时覆盖于根尖与刀片之上，用一端修整成圆形的一次性筷子在盖玻片之上轻轻敲击根尖，使其迅速分散，然后一边敲击，一边在不移动盖玻片的前提下小心撤出双面刀片；第七步，镜检：直接用光学显微镜进行观察，或用Eupara胶在盖玻片四周进行封固，制成半永久封片后观察。