[发明专利]动物胆汁与血液混合用微生物发酵提取胆红素的方法

摘要

本发明提供一种动物胆汁与血液混合用微生物发酵提取胆红素的方法，是利用生物结构多样性和活性多样性酶的生物转化过程，是将动物血液与胆汁混合用微物物制剂发酵，经均质机处理，并在提取硷化煮沸后趁热过滤去除凝固蛋白，经快速提取纯化可获高效率胆红素，从而可使收率达到1－3％高收率胆红素，胆红素含量为90％以上，此种方法技术简便，收率极高，适合工业化生产，可满足实际需要。

主权项

1、一种动物胆汁与血液混合用微生物发酵提取胆红素的方法，包括以下步骤：1)微生物扩增液的制备：体积比将发酵菌液1份、蒸馏水40～50份、葡萄糖1～3份、氯化钠0.5～1.0份、硫酸胺0.5～2份装入容器中混合均匀，22～26℃条件下发酵10～14天，PH值为3.0～4.0，得发酵菌母液；取发酵菌母液500～1000份、蔗糖200～500份加入10000～20000份的水，装入发酵容罐发酵；22～26℃条件下发酵3～5天，每隔4～8小时搅拌次，每次持续25～35分钟，待发酵物PH值达到3～4时为适度，得扩增液，置2～8℃保存备用；所述的发酵菌包括：乳酸菌、红茶菌、光合菌、酵母菌、放线菌类的一种或多种共生培养；2)胆汁与血液混合微生物发酵：体积比将新鲜胆汁与血液按4～6比6～4的比例混合后，加入10～20份扩增液，搅拌均匀，置于26～30℃条件下，持续3.5～4.5天发酵，每天搅拌1～2次，待PH值降至3.5～4.5为发酵结束，得发酵液；将发酵液用均质机裂解发酵微生物，使其达到5～10微米，以使血红蛋白和菌体中血红素加氧酶系和胆红素氧化酶充分释放；3)提取胆红素：①将1000～10000毫升裂解液放入溶器中，慢慢加入浓度为8％的氢氧化钠25～250毫升溶液，进行搅拌，使发酵裂解液的PH值为10～11，加热至沸，趁热过滤，除去凝固蛋白；②将过滤液冷至常温后，加入裂解液量的3‰～5‰的抗氧剂和裂解液量的1/5～2/5的氯仿，并搅拌均匀，此后慢慢加入盐酸溶液至PH为5～6，分液漏斗中静置分层；⑧将下层分离出的氯仿胆红素溶液水减压回流，温度控制在55～75℃，冷凝器回收氯仿；④氯仿回收完后，在减压回流装置中加入酒精冲洗，回收酒精得沉淀物--胆红素。