[发明专利]高同源度多基因家族的表达谱的构建方法有效
| 申请号： | 200710041192.0 | 申请日： | 2007-05-24 |
| 公开（公告）号： | CN101096667A | 公开（公告）日： | 2008-01-02 |
| 发明（设计）人： | 宋任涛;冯玲娜;朱佳;王刚;许政暟 | 申请（专利权）人： | 上海大学 |
| 主分类号： | C12N15/00 | 分类号： | C12N15/00;C40B50/06 |
| 代理公司： | 上海上大专利事务所 | 代理人： | 何文欣 |
| 地址： | 200444*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及高同源度基因家族中各个成员基因表达谱的构建方法。本发明将RT-PCR随机克隆与荧光实时定量PCR相结合，使用RT-PCR随机克隆获得各个成员基因的表达状态以及表达的基因的相对丰度，再使用实时荧光定量PCR获得各基因家族总体表达量，将两者结合得到基因家族所有成员基因的表达状态及各个表达的成员基因的表达谱的方法。本发明为多基因家族表达调控的研究提供了新的方法，同时也为禾本科作物醇溶蛋白含量的基因工程改造提供了理论指导。 | ||
| 搜索关键词： | 同源 多基因 家族 表达 构建 方法 | ||
【主权项】：
1.一种高同源度多基因家族的表达谱的构建方法，其特征在于该方法用于构建多基因家族所包含的各个基因家族的表达谱，具体步骤为：从多基因家族基因的表达部位提取该基因家族的总RNA，该总RNA经变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计分析和定量；再以各个样品点的总RNA为模板，Oligo(dT)16作引物进行反转录，得到反转录产物；根据表达的基因序列对多基因家族所包含的各个基因家族分别设计引物，以所述的反转录产物为模板，进行实时荧光定量PCR；以Actin作为内参基因，数据由软件Opticon3.1进行采集和分析，即可分别得到多基因家族所包含的各个基因家族在其表达过程中的表达谱。
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