[发明专利]重金属超富集植物天蓝遏蓝菜的组织培养繁殖方法

摘要

本发明涉及一种重金属超富集植物天蓝遏蓝菜的组织培养繁殖方法：将经消毒处理过的剪成0.8－1.2厘米带叶天蓝遏蓝菜茎尖/茎节，或者或者经消毒处理过的天蓝遏蓝菜种子实生苗具芽茎段依次接种到启动培养基中培养生成丛生芽苗；接种到增殖培养基中培养生成密集丛生芽；置入壮苗基本培养基中进行壮苗培养；转接到生根培养基中培养得生根苗；转移至荷格兰特液体培养基中进行水培壮苗培养，之后再将水培壮苗后的壮苗移栽到苗圃基质中进行移栽定植培养，得到蓝遏蓝菜的组织；本方法不仅可以排除外界条件的影响，四季可行，节约育苗占地，降低生产成本；而且可以在短期内得到大量健壮幼苗，进行规模化、工厂化生产。

主权项

1.一种重金属超富集植物天蓝遏蓝菜的组织培养繁殖方法，其步骤如下：1)启动培养将经消毒处理过的天蓝遏蓝菜植株的茎尖/茎节剪成0.8-1.2厘米带叶的茎尖/茎节，或者经消毒处理过的天蓝遏蓝菜种子实生苗的具芽茎段接种到启动培养基中，置于培养室中培养21-28天，生成丛生芽苗；所述启动培养基所含组分及配比为：每升启动基本培养基中含肌醇100毫克、水解乳蛋白250毫克、维生素B2 0.5-3毫克和二种植物生长激素各0.2-2毫克，pH＝5.8；所述二种植物生长激素为6-苄基嘌呤和萘乙酸；所述启动基本培养基为4736.43毫克/升的MS培养基；2)增殖培养将经启动培养的不少于2.5厘米的丛生芽苗修剪成带2-3个节的茎段接种到增殖培养基中培养21-28天；所述增殖培养基所含组分及配比为：每升增殖基本培养基中含肌醇100毫克、水解乳蛋白250毫克、维生素B2 0.5-3毫克和二种或三种植物生长激素各0.2-2毫克，pH＝5.8；所述二种植物生长激素为6-苄基嘌呤和萘乙酸；所述三种植物生长激素为6-苄基嘌呤、赤霉素和萘乙酸；所述启动基本培养基为4736.43毫克/升的MS培养基；3)壮苗培养将经过增殖培养的不少于3厘米的试管丛生芽苗修剪成带2-3个节的茎段，接种到壮苗培养基中培养21-28天；所述壮苗培养基所含组分及配比为：每升壮苗基本培养基中含肌醇100毫克、水解乳蛋白150毫克、维生素B2 0.5-3毫克和二种植物生长激素各0.2-2毫克，pH＝5.8；所述二种植物生长激素为6-苄基嘌呤和萘乙酸；所述壮苗基本培养基为4736.43毫克/升的MS培养基；4)生根培养剪取经壮苗培养3.5-5厘米的丛生芽苗，转接到生根培养基中进行生根培养15--25天，长出生根苗；所述生根培养基所含组分及配比为：每升生根基本培养基中含植物生长激素0.2-4毫克和蔗糖15克；pH＝5.8；所述的植物生长激素为吲哚丁酸或萘乙酸；所述生根基本培养基为2368.22毫克/升的MS生根基本培养基；5)水培壮苗将经生根培养的生根苗取出，洗去附着的培养基，转移至荷格兰特液体培养基中进行水培壮苗培养；其培养条件为：以泡沫板作为幼苗支持物，泡沫板大小应与水培槽口大小-致；尽量避免根部见光导致绿藻滋生；每5天更换一次荷格兰特液体培养基；22-25℃，光照16小时/天，湿度80-85％；6)移栽定植待经水培壮苗生长至根长不少于5厘米时取出，移栽到苗圃基质中，进行移栽定植；所述苗圃基质由重量份配比为1∶1花土和蛭石组成；幼苗移栽前，将苗圃基质用荷格兰特液体培养基淋透；移栽后，用聚氯乙烯薄膜覆盖，保持湿度90-95％，注意通风；每5天喷水1次，14天喷施1次荷格兰特液体培养基；移栽苗定植10天后揭去覆膜；再保持温室内湿度80％，温度20-30℃，每天喷水3次，14天喷施1次荷格兰特液体培养基，21天喷施1次尿素，进行速生培养，完成天蓝遏蓝菜的组织繁殖培养。