[发明专利]中国荷斯坦牛瓜氨酸血症基因的检测方法及检测试剂盒无效
| 申请号： | 200610069458.8 | 申请日： | 2006-10-23 |
| 公开（公告）号： | CN1952175A | 公开（公告）日： | 2007-04-25 |
| 发明（设计）人： | 李建斌;高运东;王红梅;仲跻峰 | 申请（专利权）人： | 山东奥克斯生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 济南圣达专利商标事务所 | 代理人： | 李健康 |
| 地址： | 250100山东省*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种中国荷斯坦牛瓜氨酸血症基因的检测方法，包括牛血样品采集，基因组DNA提取，PCR扩增引物的设计，PCR扩增，限制性内切酶消化，凝胶电泳步骤；其中：所述引物序列是：1，GTGTTCATTGAGGACATC；2，CCGTGAGACACATACTTG；所述PCR扩增反应循环参数为：95℃5min，94℃1min，60℃1min，72℃ 30 s，35个循环，72℃延伸10min，降温至4℃结束；所述限制性内切酶消化用Eco471酶切。本发明还同时公开了瓜氨酸血症基因的检测试剂盒，包括PCR试剂盒、RFLP试剂盒两部分。本发明对建立健全奶牛育种体系，剔除隐性缺陷基因，保证牛群种质，获得稳定的遗传进展，保持奶业的可持续发展，有着重要的意义。 | ||
| 搜索关键词： | 中国 斯坦 瓜氨酸 基因 检测 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
1.中国荷斯坦牛瓜氨酸血症基因的检测方法，包括牛血样品采集，基因组DNA提取，PCR扩增引物的设计，PCR扩增，限制性内切酶消化，凝胶电泳步骤；其特征在于：所述引物序列是：1，GTGTTCATTGAGGACATC；2，CCGTGAGACACATACTTG；所述PCR扩增反应体系为25μl；其中：DNA模板1μl，50ng；10×buffer 2.5μl；dNTPs 2.0μl；引物各0.5μl；Mg2+1.5μl；H2O 16.8μl；Taq酶0.5U；循环参数为：95℃ 5min，94℃ 1min，60℃ 1min，72℃ 30s，35个循环，72℃延伸10min，降温至4℃结束；所述限制性内切酶消化用限制性内切酶Eco471酶切。
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