[发明专利]抗Axin的抗体C8的制备方法无效
| 申请号： | 200510072500.7 | 申请日： | 2005-05-20 |
| 公开（公告）号： | CN1765927A | 公开（公告）日： | 2006-05-03 |
| 发明（设计）人： | 骆晶晶;贺颖;陈明谅;林圣彩 | 申请（专利权）人： | 厦门大学 |
| 主分类号： | C07K16/18 | 分类号： | C07K16/18;C12N15/70;C12P19/34 |
| 代理公司： | 厦门南强之路专利事务所 | 代理人： | 陈永秀;马应森 |
| 地址： | 361005福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 抗Axin的抗体C8的制备方法，涉及一种抗Axin的抗体C8的制备方法。提供一种效价高、特异性强、能用于进行内源Axin的免疫印迹、免疫沉淀分析的抗Axin的抗体C8制备方法。先用PGR方法扩增出挪威鼠表达Axin 751－832氨基酸序列DNA片段，并连接到原核表达载体pGST parallel中构建重组质粒，再转化到大肠杆菌BL21菌株中，通过IPTG诱导，表达出融合有GST的Axin片断GST－Axin751－832；用谷胱甘肽－琼脂糖树脂纯化该抗原蛋白片断，4次免疫新西兰兔后，采血，纯化抗体血清。能快速大量获得抗原蛋白，抗体纯化方法独特，成本低，过程简单。其抗体效价高，特异性强。能检测到细胞内含量极其稀少的内源Axin。 | ||
| 搜索关键词： | axin 抗体 c8 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.抗Axin的抗体C8的制备方法，其特征在于其步骤为：首先用PCR的方法扩增出挪威鼠编码Axin751-832氨基酸序列的DNA片段，将该片段连接到原核表达载体pGST parallel中构建重组质粒，转化到大肠杆菌BL21菌株中，通过IPTG诱导，表达出融合有GST的Axin片断GST-Axin751-832；然后用谷胱甘肽-琼脂糖树脂纯化该抗原蛋白片断，4次免疫新西兰兔后，采血，纯化抗体血清，得到抗Axin的多克隆抗体。
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