[发明专利]一种低温碱性脂肪酶的分离纯化方法无效
申请号: | 200410096667.2 | 申请日: | 2004-12-03 |
公开(公告)号: | CN1614014A | 公开(公告)日: | 2005-05-11 |
发明(设计)人: | 王跃军;孙谧;王海英;阎晓玲 | 申请(专利权)人: | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 |
主分类号: | C12N9/20 | 分类号: | C12N9/20 |
代理公司: | 北京金信联合知识产权代理有限公司 | 代理人: | 史和初 |
地址: | 266071*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及一种新型低温碱性脂肪酶的分离纯化方法,该方法包括用三氯甲烷萃取发酵上清液,用100kda中空纤维柱进行超滤,10kda中空纤维柱进行浓缩,然后用CMSephanose FF阳离子交换层析柱进行层析,得电泳纯低温碱性脂肪酶,该方法消除诱导剂对酶纯化的影响,纯度高,大大简化分离纯化方法,是一种新型工业化分离纯化方法。 | ||
搜索关键词: | 一种 低温 碱性 脂肪酶 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】:
1、一种低温碱性脂肪酶的分离纯化方法,包括下列步骤:(1)在发酵上清液中加入三氯甲烷进行充分搅拌,于3-5℃静置30分钟,以转速4000rpm/min离心40分钟,去除杂蛋白并收集上清液;(2)超滤浓缩取步骤1的上清液,经100kda中空纤维柱超滤,再以10kda中空纤维柱浓缩;(3)阳离子交换柱层析以CM Sephanose FF阳离子交换层析柱对脂肪酶进行层析,分步收集洗脱液,得电泳纯低温碱性脂肪酶。
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