[发明专利]一种半乳甘露聚糖肽的制取方法及产品无效
申请号: | 03138916.3 | 申请日: | 2003-07-25 |
公开(公告)号: | CN1482144A | 公开(公告)日: | 2004-03-17 |
发明(设计)人: | 程显好;高先领;隋晓春;侯永勤;贺连智;张友军;刘刚 | 申请(专利权)人: | 山东智灵生物工程有限公司 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;C07K14/37;C07K14/415;C07K1/14 |
代理公司: | 山东佳民专利事务所有限公司 | 代理人: | 徐槐 |
地址: | 250013*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 一种半乳甘露聚糖肽的制取方法及产品属于医药范畴。本发明是以“虫草原料”为原料,采用乙醇分级沉淀,离子交换柱层析和分子筛层析相结合的复合分离纯化技术,分离出层析纯和电泳纯半乳甘露聚糖肽的制取方法及产品。本发明的产品对试验小鼠具有免疫调节作用,对小鼠S180肉瘤的抑瘤率达51%,故是治疗肿瘤病的较佳注射药物。本发明为虫草原料的应用开辟了另一条途径;为制取半乳甘露聚糖肽增加了一种原料;也为本发明产品的生产提供了优级方法。 | ||
搜索关键词: | 一种 甘露 聚糖 制取 方法 产品 | ||
【主权项】:
1、一种半乳甘露聚糖肽的制取方法及产品,包括;原料准备、有用成分提取、浓缩、离心分离、复合分离纯化及冷冻干燥、制得本发明产品,其特征在于本发明的制取方法是:<一>、原料准备:(1)、虫草原料:无杂质、水份≤8%、虫草多糖≥6.0%;(2)、水:蒸馏水、无离子水;(3)、乙醇:无水乙醇、95%乙醇;(4)、丙酮:分析纯或纯度高于分析纯;<二>虫草多糖I的制取:将虫草原料装入提取装置中,再按虫草原料∶水=1∶10-20之比例(重量比),往提取设备中加入蒸馏水,装完料,安好设备,开始提取;在80℃-100℃和搅拌条件下,提取1-2小时,停止;待料温降至40℃以下,开始过滤;滤液保存,残渣可再按第一次提取条件再提取1次后,弃残渣,将提取液全部装入蒸馏设备中,在60°±5℃条件下进行浓缩,当提取液内固形物≥10%时,停止浓缩,在浓缩液中加入相当浓缩液3倍体积的95%乙醇,搅拌均匀,静置沉淀≥4小时,进行分离,收集沉淀物;在沉淀物中加入丙酮脱水,再分离,收集分离出的沉淀物在45℃-60℃条件下进行干燥,得到糖含量≥32.5%,蛋白蛋≥45.2%的虫草多糖I;<三>虫草多糖II的制取:将合格的虫草多糖I放入容器中,加入无离子水并搅拌,至虫草多糖I的浓度达4-6%时,在15℃-30℃条件下向已配制好的5%虫草多糖I的溶液中加入无水乙醇,同时搅拌至乙醇在溶液中含量≥40%时止,稍静置后进行分离,去掉沉淀,在滤液中加入无水乙醇,同时搅拌,至乙醇在滤液中含量在63-67%时停,静置到沉淀析出完全时,进行分离,收集沉淀;在沉淀物中加入丙酮进行脱水干燥,得到虫草多糖II产品,产品的质量要求:糖含量≥49.3%,蛋白含量≥23.9%;<四>、半乳甘露聚糖肽的制取:将制取合格的虫草多糖II置于容器中,在常温和搅拌下加入无离子水,将其配成0.8-1.2%浓度的水溶液,搅均;对上述0.8-1.2%浓度水溶液进行DEAE-Saphedex dex G-50柱层析,然后进行洗脱;第一次洗脱用无离子水洗脱,洗至没有紫外吸收峰出现止;第二次洗脱用0.1MNaCL溶液洗脱,洗至没有紫外吸收峰出现止;洗脱毕,将洗脱物收集一起并装入浓缩装置中进行浓缩,至固形物含量≥10%时,再进行Saphedex G-50柱层析,以254nm波长检测流出物,这时得到两个洗脱峰,收集前一个洗脱峰进行冷冻干燥,得到半乳甘露聚糖肽冻干粉,该种冻干粉是本发明最终产品。
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