[发明专利]烟草细胞内氧化还原酶制剂的纯化、分子修饰和低聚物保护方法及生产工艺

摘要

本发明提出一种烟草细胞内氧化还原酶制剂的纯化、分子修饰和低聚物保护方法及生产工艺,它从鲜活烤烟细胞内纯化分离氧化还原酶群,并用辅酶和辅基置换对该酶群进行酶分子修饰,有效提高该类胞内酶活性;通过水含低聚物活性保护,有效延长了酶群活性半衰期,并实现低含水介质条件下的高效酶解作用,配合调制复烤后烤烟的胞内酶群放活处理,本发明解决了酶制剂在烟草打叶复烤工艺中高温条件下对酶活性的保护以及在卷烟工艺特定的低含水条件下酶制剂活性的发挥。

主权项

1、一种烟草细胞内氧化还原酶制剂的纯化、分子修饰和低聚物保护方法及生产工艺，其特征在于工艺流程如下：A、鲜活烟叶或顶杈于4～8℃下加鲜组织3～5倍的5％～10％亚硫酸氢钠溶液匀浆10～20分钟至0.2mm，按常规工艺过滤或压滤排除固形物。B、滤液于1～9℃、4000～145000转/分钟离心分离，取液体于棉纤维或石英柱PH3～8醋酸洗脱液柱沉析，排除废液。C、酶坯溶液加入0.01～0.1％EDTA等1号辅料，在1～9℃沉淀10～20分钟后，过滤排除沉淀物获得净化液。D、净化液于1～9℃下加入适量工程辅酶和辅基等2号辅料进行分子修饰工程辅酶置换，完成后酶液由淡黄色转为淡绿色，即加入0.01％的糖类低聚物活性保护。E、酶溶液于-4℃至-8℃冷冻干燥浓缩，制剂液体缩小2～8倍时，于8℃解冻包装。