[发明专利]简单快速的mRNA层析芯片检测技术

摘要

本发明涉及一种直接快速的mRNA层析杂交芯片检测技术。该检测技术包括cDNA探针在层析膜上的阵列和固定、被检样本用强力变性剂溶解释放RNA、调节离子强度、加入生物素标记第二探针寡核苷酸(dT)和亲和素包被的胶体金颗粒溶液、层析杂交检测和信号分析等步骤。该技术可用于基因表达谱的分析研究和根据基因表达模型进行的临床诊断。该技术操作非常简便,不需要RNA的分离和纯化,不需要特制的RNA操作环境,没有PCR扩增标记或其他标记操作。整个层析杂交检测时间少于1小时。此外,该技术检测成本低廉,操作人员不需特别培训,非常适合于医院、基层单位使用。

主权项

1.本发明涉及mRNA快速层析芯片的技术和方法，可用于基因表达谱的研究和基因活动状态的鉴别，该技术步骤包括：a)将cDNA探针或寡核苷酸探针阵列于微孔纤维膜上，制成膜条阵列芯片；b)将含有mRNA的细胞或样本用强烈变性剂溶解，释放RNA；c)稀释并调节变性剂溶液的离子浓度，75℃加温变性RNA；d)加入生物素标记的Poly(T)和亲和素包被的胶体金颗粒溶液；e)将膜条芯片的一端浸入变性剂溶液，另一端与吸水纤维相连，层析杂交样本，显示信号；f)银还原信号加强，信号分析。