从HCV感染的样品扩增HCV核酸的方法，包括通过两步PCR扩增互补于来自样品的HCV RNA的基因组的DNA模板的区段，其中第一步PCR使用第一外引物和第二外引物，并且第二步PCR使用第一内引物和第二内引物。第一外引物的核苷酸序列包含SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：9所示的核苷酸序列，其中任选地，1、2或3个核苷酸是SEQ ID NO：9的那些核苷酸之外的其它核苷酸。第二外引物的核苷酸序列包含SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：4所示的核苷酸序列；或SEQ ID NO：10或SEQ ID NO：11所示的核苷酸序列，其中任选地，1、2或3个核苷酸是SEQ ID NO：10和SEQ ID NO：11的那些核苷酸之外的其它核苷酸。第一内引物的核苷酸序列包含SEQ ID NO：5或SEQ ID NO：12所示的核苷酸序列，其中任选地，1、2或3个核苷酸是SEQ ID NO：12的那些核苷酸之外的其它核苷酸。第二内引物的核苷酸序列包含SEQ ID NO：6或SEQ ID NO：7所示的核苷酸序列；或SEQ ID NO：13或SEQ ID NO：14所示的核苷酸序列，其中任选地，1、2或3个核苷酸是SEQ ID NO：13和SEQ ID NO：14的那些核苷酸之外的其它核苷酸。
