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[发明专利]改进液体培养基的制备方法-CN201711235458.5在审
发明人：范杨艳;吴强;王婷婷;马礼耕;朱涛 -专利权人：成都欧林生物科技股份有限公司
申请日： 2017-11-30 - 公布日： 2018-04-17 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了改进液体培养基的制备方法，包括以下步骤称取以下原料溶剂为注射用水的相对用量为1000ml含氮源为胰酪胨15～80g，胰胨20～70g，精选大豆胨10～80g，大豆胨10～80g，酸水解酪蛋白10～70g，酵母提取物15～40g，酵母浸粉5～40g中的任意三种组合物；碳源为葡萄糖5.0～50g；盐类为K2HPO40～12.0g，KCl0～7.0g，Na2HCO30～5.0g，NaCl3.0～10.0g，MgSO4·7H2O0.4～5.0g，CaCl20～0.14g；微量元素为L‑半胱氨酸盐酸盐0.12～1.80g，烟酸0.5～1.2mg，腺嘌呤5.5～10.5mg，FeSO42.5～6.5mg；用注射用水对上述原料依次进行溶解；经定容、调节pH值、灭菌后获得液体培养基。发明培养基获得荚膜较厚的菌种，利于提高荚膜多糖的产量，提高生产效率，降低生产成本。
改进液体培养基制备方法

[发明专利]用于肺炎荚膜多糖规模化生产的菌种筛选方法-CN201711235794.X在审
发明人：吴强;陈元芬;王宇;马礼耕 -专利权人：成都欧林生物科技股份有限公司
申请日： 2017-11-30 - 公布日： 2018-02-23 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了用于肺炎荚膜多糖规模化生产的菌种筛选方法，包括以下步骤步骤1，配制液体培养基；步骤2，配制固体培养基；步骤3，采用步骤1制备的液体培养基进行培养获得一代菌种；步骤4，采用步骤2制备的固体培养基进行培养获得二代菌种；步骤5，采用步骤1制备的液体基培养，获得三代菌种；步骤6，荚膜染色、革兰氏染色，将荚膜厚的菌种对应编号的菌液保留；步骤7，四代培养将荚膜厚的菌液在步骤1制备的液体培养基培养；步骤8，菌种收获、保存。通过本发明提供的方式筛选出荚膜较厚的菌种，在以前的基础上提高了约80％的荚膜多糖产量，并且多糖经检验符合欧洲药典标准，大大提高了多糖产量，提高了生产效率、降低了成本。
用于肺炎荚膜多糖规模化生产菌种筛选方法

[发明专利]基于提高密封性的检测口改进结构-CN201510549333.4有效
发明人：罗力心;赵飞;马礼耕 -专利权人：成都欧林生物科技股份有限公司
申请日： 2015-08-31 - 公布日： 2017-10-13 - 主分类号： F24F11/02 文献下载
摘要：本发明涉及基于提高密封性的检测口改进结构，包括检测口、检测盖，检测口开设有与密封圈配合的凹槽Ⅰ，检测盖内侧开设有两个与密封圈配合的凹槽Ⅱ，密封圈的一侧设置有凸环Ⅰ，凸环Ⅰ与凹槽Ⅰ配合，密封圈上凸环Ⅰ的对侧设置有俩凸环Ⅱ，凸环Ⅱ与凹槽Ⅱ配合，检测口外套设有固定筒，固定筒的高度高于检测口，固定筒配合设置有固定盖，固定盖的内部设置有弹簧。本发明通过凸环Ⅰ嵌入凹槽Ⅰ内，由于凸环Ⅰ与凹槽Ⅰ配合，凸环Ⅱ与凹槽Ⅱ的嵌入式配合，避免了现有检测口装置的密封圈易打滑的问题，提高密封性能；通过固定盖内的弹簧挤压挤压检测盖，进而挤压密封圈，实现检测口与检测盖之间的密封，克服了现有检测口装置密封性不好的问题。
基于提高密封性检测改进结构

[发明专利]一种层析纯化法生产破伤风类毒素原液的方法-CN201410521738.2有效
发明人：陈道远;马礼耕;罗力心;陈克平;李靖 -专利权人：成都欧林生物科技股份有限公司
申请日： 2014-09-30 - 公布日： 2017-08-25 - 主分类号： C07K14/33 文献下载
摘要：本发明公开了一种层析纯化法生产破伤风类毒素原液的方法，属于生物技术领域，生产方法包括将破伤风杆菌培养液过滤，滤液经30KD的超滤滤膜包超滤浓缩至原体积的1/20～1/10，洗涤浓缩液并收集；浓缩液经离子交换层析、疏水层析、一次膜过滤、脱毒、超滤和二次膜过滤得破伤风类毒素原液。本发明提供的一种层析纯化法生产破伤风类毒素原液的方法具有工艺简单、操作方便、生产效率高、成本低的优点，经本发明方法生产的破伤风类毒素成分更加单一、纯度更高，从而获得更好的免疫原性，降低接种副反应的发生。
一种层析纯化生产破伤风类毒素原液方法

[发明专利]一种A群C群脑膜炎球菌多糖的制备方法-CN201610746650.X在审
发明人：吴强;马礼耕;钟正丹 -专利权人：成都欧林生物科技股份有限公司
申请日： 2016-08-29 - 公布日： 2017-02-01 - 主分类号： C12P19/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种A群C群脑膜炎球菌多糖的制备方法，包括以下步骤（1）将脑膜炎球菌进行发酵培养并进行杀菌处理，得到已杀菌的培养液；（2）脑膜炎球菌荚膜多糖制备；（3）将粗制多糖溶进行层析洗脱，收集含有多糖的目标峰，再将收集的多糖溶液以注射用水为超滤液，用超滤膜包进行脱盐，脱盐后的溶液即为A群C群脑膜炎球菌多糖溶液。本发明首先通过杀菌处理得到灭活的培养液，再制得荚膜多糖，再采用层析法对荚膜多糖进行纯化，避免了传统纯化方法中对苯酚的大量使用，在保证了纯化质量的基础上，有效的避免了苯酚对环境的破坏，并且多糖回收率与传统苯酚抽提法相近，操作简单，适合大规模生产。
一种脑膜炎球菌多糖制备方法

[发明专利]一种A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的制备方法-CN201610746652.9在审
发明人：吴强;伍长华;马礼耕 -专利权人：成都欧林生物科技股份有限公司
申请日： 2016-08-29 - 公布日： 2016-12-21 - 主分类号： A61K39/095 文献下载
摘要：本发明公开了一种A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的制备方法，包括以下步骤：（1）A群C群脑膜炎球菌荚膜多糖制备并纯化；（2）将C群流脑多糖配制溶液，然后在搅拌下加入CDAP，静置后加入ADH反应得到反应物溶液，将反应物溶液透析后得A群C群流脑多糖‑ADH衍生物；（3）将A群C群流脑多糖‑ADH衍生物和破伤风类毒素按质量比为1:1混合，加入EDAC，搅拌反应再透析得反应物，层析法进行纯化，收集外水体积洗脱组份，除菌过滤后得原液；（4）冻干保护即得。本发明有效的避免了避免纯化过程对苯酚的使用，以及制备衍生物过程对溴化氰的使用，以使得整个制备过程无毒伤害，能够减少环境污染，对环境起到一定的保护作用。
一种脑膜炎球菌多糖结合疫苗制备方法

[发明专利]一种白喉类毒素的纯化方法-CN201610622889.6在审
发明人：吴强;陈道远;马礼耕;伍长华 -专利权人：成都欧林生物科技股份有限公司
申请日： 2016-08-02 - 公布日： 2016-12-14 - 主分类号： C07K14/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种白喉类毒素的纯化方法，它包括以下步骤：离心、超滤浓缩、一段盐析、二段盐析、超滤脱盐、脱毒和层析。本发明提供的一种白喉类毒素的纯化方法，该方法制备的白喉类毒素原液纯度高，可达2500Lf/mg，从而降低了接种后副反应的发生，安全性更高；本发明方法操作简单、纯化方便、成本低、适用于工业化大规模生产。
一种白喉类毒素纯化方法

[发明专利]基于提高维修操作的摇床-CN201510543162.4在审
发明人： 马礼耕;伍长华;王乾 -专利权人：成都欧林生物科技股份有限公司
申请日： 2015-08-31 - 公布日： 2016-01-13 - 主分类号： B01F11/00 文献下载
摘要：本发明涉及基于提高维修操作的摇床，包括基座，基座上端设置有玻璃罩，玻璃罩的一个侧壁设置有提拉门，基座上设置有做往复运动的床体，床体上设置有固定盘，固定盘的外壁设置有固定带，固定带的端部设置有固定孔，固定孔与设置在固定环上的挂钩配合，所述固定盘的底部至少设置有3个固定杆，床体上设置有与固定杆配合的凹槽，凹槽的一个侧壁设置有弹簧，弹簧的端部连接有滑板，滑板的侧壁设置有与固定杆外壁配合的夹持槽Ⅰ，凹槽内与设置有弹簧的侧壁相对的侧壁设置有夹持块，夹持块的侧壁设置有与夹持槽Ⅰ配合的夹持槽Ⅱ，凹槽、夹持块、滑板围成固定腔。本发明克服了现有的往复式摇床上的固定机构不能拆卸的问题。
基于提高维修操作

[实用新型]便于密封的检测口装置-CN201520670146.7有效
发明人：罗力心;赵飞;马礼耕 -专利权人：成都欧林生物科技股份有限公司
申请日： 2015-08-31 - 公布日： 2015-12-30 - 主分类号： G01N15/00 文献下载
摘要：本实用新型涉及便于密封的检测口装置，包括检测口、检测盖，检测口开设有与密封圈配合的凹槽Ⅰ，检测盖内侧开设有两个与密封圈配合的凹槽Ⅱ，密封圈的一侧设置有凸环Ⅰ，凸环Ⅰ与凹槽Ⅰ配合，密封圈上凸环Ⅰ的对侧设置有俩凸环Ⅱ，凸环Ⅱ与凹槽Ⅱ配合，检测口外套设有固定筒，固定筒的高度高于检测口，固定筒配合设置有固定盖，固定盖的内部设置有弹簧。本实用新型通过凸环Ⅰ嵌入凹槽Ⅰ内，由于凸环Ⅰ与凹槽Ⅰ配合，凸环Ⅱ与凹槽Ⅱ的嵌入式配合，避免了现有检测口装置的密封圈易打滑的问题，提高密封性能；通过固定盖内的弹簧挤压挤压检测盖，进而挤压密封圈，实现检测口与检测盖之间的密封，克服了现有检测口装置密封性不好的问题。
便于密封检测装置

[实用新型]固定机构可拆卸的摇床改进结构-CN201520664284.4有效
发明人： 马礼耕;伍长华;王乾 -专利权人：成都欧林生物科技股份有限公司
申请日： 2015-08-31 - 公布日： 2015-12-30 - 主分类号： B01F11/00 文献下载
摘要：本实用新型涉及固定机构可拆卸的摇床改进结构，包括基座，基座上端设置有玻璃罩，玻璃罩的一个侧壁设置有提拉门，基座上设置有做往复运动的床体，床体上设置有固定盘，固定盘的外壁设置有固定带，固定带的端部设置有固定孔，固定孔与设置在固定环上的挂钩配合，所述固定盘的底部至少设置有3个固定杆，床体上设置有与固定杆配合的凹槽，凹槽的一个侧壁设置有弹簧，弹簧的端部连接有滑板，滑板的侧壁设置有与固定杆外壁配合的夹持槽Ⅰ，凹槽内与设置有弹簧的侧壁相对的侧壁设置有夹持块，夹持块的侧壁设置有与夹持槽Ⅰ配合的夹持槽Ⅱ，凹槽、夹持块、滑板围成固定腔。本实用新型克服了现有的往复式摇床上的固定机构不能拆卸的问题。
固定机构可拆卸改进结构

[发明专利]一种无细胞百日破联合疫苗及其制备方法-CN201510140594.0在审
发明人：陈道远;李洪光;吴强;陈元芬;马礼耕;韩炼;罗力心 -专利权人：成都欧林生物科技股份有限公司
申请日： 2015-03-27 - 公布日： 2015-06-17 - 主分类号： A61K39/116 文献下载
摘要：本发明公开了一种无细胞百日破联合疫苗及其制备方法，属于疫苗生产制备技术领域，无细胞百日破联合疫苗由下述组分的原料组成：百日咳毒素：5～40μg；丝状血凝素：5～40μg；百日咳黏附素：2～10μg；白喉类毒素：10～25lf；破伤风类毒素：4～10lf；氢氧化铝：1.0～2.0mg/ml；氯化钠：7.5～9.5g/L。制备方法包括制备各单价疫苗原液、合并和稀释。本发明的疫苗成分明确，容易进行质量控制，副作用更小，安全性更好；制备方法具有操作简单、制备方便、成本低、适宜于工业化大规模生产。
一种细胞百日联合疫苗及其制备方法

[发明专利]一种分离纯化的无细胞百白破-b型流感嗜血杆菌-A群C群脑膜炎球菌联合疫苗及其制备方法-CN201510141590.4在审
发明人：陈道远;李洪光;吴强;马礼耕;陈元芬;罗力心;李靖 -专利权人：成都欧林生物科技股份有限公司
申请日： 2015-03-27 - 公布日： 2015-06-10 - 主分类号： A61K39/10 文献下载
摘要：本发明公开了一种联合疫苗及其制备方法，联合疫苗由A组分和B组分组成，A组分为液体制剂，它由百日咳毒素、丝状血凝素、百日咳黏附素、白喉类毒素、破伤风类毒素、氢氧化铝和氯化钠组成；B组分为冻干制剂，它由A群脑膜炎多糖结合物、C群脑膜炎多糖结合物、b型流感嗜血杆菌多糖结合物和乳糖组成。疫苗的制备方法包括制备无细胞百白破疫苗半成品、AC群脑膜炎球菌-b型流感嗜血杆菌联合疫苗半成品、分装和包装。本发明提供的疫苗具有安全、有效、可控及一针防多病的特点，制备方法操作简单、制备方便、成本低，适宜于工业化大规模生产。
一种分离纯化细胞百白破流感嗜血杆菌脑膜炎球菌联合疫苗及其制备方法

[实用新型]一种高速离心机冷却管的固定装置-CN201420661768.9有效
发明人： 马礼耕;罗春荣 -专利权人：成都欧林生物科技股份有限公司
申请日： 2014-11-07 - 公布日： 2015-04-08 - 主分类号： B04B15/02 文献下载
摘要：本实用新型涉及一种高速离心机冷却管的固定装置，包括底座、底座中心设置的固定盘，固定盘内设置有固定孔，底座上端设置有中空的半圆柱体Ⅰ，半圆柱体Ⅰ的一侧半圆柱体Ⅱ的一侧连接，半圆柱体Ⅱ上设置有开设有通孔的卡板，半圆柱体Ⅰ上设置有固定片，固定片与半圆柱体Ⅰ之间形成有空隙，固定片上设置有与之配合的插杆，半圆柱体Ⅰ上端柱壁上开设有通孔Ⅰ，通孔Ⅰ连接出水管，半圆柱体Ⅱ下端柱壁上开设有通孔Ⅱ，通孔Ⅱ连接进水管。本实用新型通过在固定装置的底座上设置可以人为控制开启与闭合的半圆柱体Ⅰ与半圆柱体Ⅱ，克服了现有固定装置在插入转鼓时操作不方便的问题。
一种高速离心机冷却管固定装置

[发明专利]一种分离纯化百日咳毒素和丝状血凝素的方法-CN201410516960.3在审
发明人：陈道远;吴强;马礼耕;伍长华;李建霖 -专利权人：成都欧林生物科技股份有限公司
申请日： 2014-09-30 - 公布日： 2015-01-28 - 主分类号： C07K14/235 文献下载
摘要：本发明公开了一种分离纯化百日咳毒素和丝状血凝素的方法，它包括：S1.样品处理：百日咳杆菌培养结束后去除菌体、收集上清液，上清液用超滤膜包浓缩；S2.一次层析：包括洗脱杂蛋白、分离百日咳毒素和分离纯化丝状血凝素；S3.二次层析：将分离的百日咳毒素粗制品上样于CaptoMMC层析柱，缓冲液洗脱，收集OD₂₈₀洗脱峰处的洗脱液，即为纯化的百日咳毒素。本发明采用CaptoSPImpRes层析柱、CaptoMMC层析柱对百日咳杆菌培养液的上清液进行分离纯化，可精确得到PT和FHA，质量可控，分离纯化百日咳抗原蛋白的纯度达95%以上，该方法具有操作简单、纯化速度快、成本低的优点。
一种分离纯化百日咳毒素丝状血凝素方法

[发明专利]一种分离纯化百日咳杆菌粘附素的方法-CN201410516831.4在审
发明人：陈道远;吴强;马礼耕;伍长华;陈克平 -专利权人：成都欧林生物科技股份有限公司
申请日： 2014-09-30 - 公布日： 2015-01-07 - 主分类号： C07K14/235 文献下载
摘要：本发明公开了一种分离纯化百日咳杆菌粘附素的方法，它包括以下步骤：样品处理：S1.收集百日咳杆菌菌体，菌体经重悬、浸提、离心去除沉淀，将上清液超滤浓缩并调pH值到7.0；S2.一次洗脱：上清液上样于CaptoAdhere层析柱上，用缓冲液洗脱，收集洗脱液；S3.透析：洗脱液在pH4.5～5.5、15～25mM NaAc溶液中进行透析脱盐，得透析液；S4.二次洗脱：透析液上样于CaptoSPImRes层析柱，洗脱并收集洗脱液即为纯化的百日咳杆菌粘附素。本发明采用CaptoAdhere层析柱、CaptoSPImRes层析柱对百日咳杆菌培养液的菌体进行分离纯化，所得抗原蛋白百日咳杆菌粘附素成分明确、质量可控，纯化方法具有操作简单、纯化速度快、成本低的优点。
一种分离纯化百日咳杆菌粘附方法

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