本发明提供了一种鉴别水稻稻瘟病抗性基因座Pik功能基因的插入缺失分子标记及其应用,涉及农业生物技术领域。本发明要求保护一种鉴别水稻稻瘟病抗性基因座Pik功能基因的插入缺失分子标记,插入缺失分子标记的物理位置为水稻稻瘟病抗性基因座Pik功能基因的828‑836位点处。本发明通过引物对SEQ ID NO.1‑2从水稻基因组DNA中扩增出与功能基因呈特异性带型的分子标记Pik‑GN。本发明所提供的稻瘟病抗性基因座Pik功能基因的分子标记具有重要的应用价值,利用此标记可以提高水稻品种/种质资源Pik位点功能基因型检测以及分子标记辅助选择育种的效率。
本发明涉及一种水稻矮化、多分蘖基因Os11g0587000突变体及其应用。所述突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码的蛋白其氨基酸序列如SEQ ID No.3所示,基因具有如SEQ ID No.2所示的核苷酸序列,该蛋白质源于水稻基因组中一段基因序列,通过破坏其编码蛋白的生物学功能降低其株高、分蘖表型。本发明通过CRISPR/Cas9技术定点敲除了水稻矮化、多分蘖基因Os11g0587000,获得了该基因功能缺失突变体种质,该突变体不仅分蘖数多,而且单蘖分生能力强,可以用于解决水稻基础研究受自然环境制约,建立室内大规模种植的研究体系,同时水稻矮化育种,能够解决抗倒性、耐密性。
本发明属于植物基因工程领域,提供了arf1基因3′‑UTR及其在控制基因表达中的应用,arf1基因3′UTR序列如SEQ ID NO.1所示,是将编码arf1基因3′‑UTR的核苷酸序列与报告基因GUS重组后,通过转基因技术将其整合到植物细胞中,随宿主基因组表达。带有3′‑UTR的GUS与带有Tnos的GUS相比,蛋白产物显著增加。本发明还提供了arf1基因3′‑UTR在转基因植物中的应用。
本发明属于植物基因工程领域,提供了AQP基因3’-UTR及其在控制基因表达中的应用,AQP基因3’-UTR序列如SEQ ID NO.1所示,是将编码AQP基因3’-UTR的核苷酸序列与报告基因GUS重组后,通过转基因技术将其整合到植物细胞中,随宿主基因组表达。带有3’-UTR的GUS与带有Tnos的GUS相比,蛋白产物显著增加。本发明还提供了AQP基因3’-UTR在转基因植物中的应用。
本发明提供了一种转Cry1Ab抗虫基因水稻品系mfb-MH3301的检测方法,属于生物技术领域。所述方法是转化体mfb-MH3301中外源基因Cry1Ab及其表达框在水稻染色体上插入片段及其旁侧特异序列SEQ ID NO:1及基于该序列建立的特异性PCR扩增鉴定技术。PCR所用正向引物依据SEQ ID NO:1中1-500位序列设计,反向引物依据SEQ ID NO:1中501-2000位序列设计。该PCR方法可作为鉴定转基因水稻品系mfb-MH3301及该品系的衍生系的有效手段。
本发明提供了一种转Cry1Ab抗虫基因水稻品系mfb-MH86的检测方法。所述方法是转化体mfb-MH86中外源基因Cry1Ab表达框在水稻染色体上插入片段及其5’端旁侧特异序列SEQ ID NO:1和3’端旁侧特异序列SEQ ID NO:2,以及基于这2段序列建立的特异性PCR扩增鉴定技术。PCR所用LB端正向引物依据SEQ ID NO:1中1-390位序列设计,反向引物依据SEQ ID NO:1中391-2000位序列设计;PCR所用RB端正向引物依据SEQ ID NO:2中1-1300位序列设计,反向引物依据SEQ ID NO:2中1301-2000位序列设计。该PCR方法可作为特异性鉴定转基因水稻品系mfb-MH86及该品系的衍生系的有效手段。