本发明公开了一种提高重组N‑乙酰葡糖胺转移酶II可溶性表达的方法,其中,一种提高重组N‑乙酰葡糖胺转移酶II在大肠杆菌中可溶性表达量的方法,其包括,构建截短型N‑乙酰葡糖胺转移酶II,得GnT‑II‑ΔTM,序列如SEQ ID NO:1所示;构建重组表达质粒;将所述重组表达质粒转化表达宿主菌,构建重组原核表达菌株;培养所述重组原核表达菌株,诱导表达。本发明在大肠杆菌中成功表达并提高重组人源GnT‑II的可溶性表达量,且该酶在体外具有催化活性,解决了哺乳动物膜蛋白GnT‑II原核表达极易降解、纯化困难的技术问题,可以大量制备重组GnT‑II。