本发明提供用于检测无乳链球菌的RPA引物、探针和检测方法。其引物序列如下:针对SIP基因:上游引物SEQ ID No.1:5’‑CACCGGTAAGAACTGTAGCAGCCCCTAGAGTG‑3’下游引物SEQ ID No.2:5’‑CTTCAGTCGCTTGTAACTTACTGTCTGTAGC‑3’。本发明的有益效果包括:(1)本发明将RPA技术与荧光检测相结合,可以快速准确的检测无乳链球菌。(2)本发明特异性强,灵敏度高,可在恒温37‑42℃下进行反应,大大减少了对于昂贵温控设备的要求,且在20min内完成反应,可以快速的对无乳链球菌进行检测,具有较高实用价值。