本发明属于分子生物学领域,公开了一种柱状黄杆菌毒力蛋白在病原检测和弱毒株制备中的应用,所述的柱状黄杆菌毒力蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.3所示。利用该毒力蛋白,设计抗体,可用于柱状黄杆菌病原菌的检测。通过在柱状黄杆菌上缺失编码该蛋白的毒力基因,可获得柱状黄杆菌弱毒株,利用该弱毒株,可以实现柱状黄杆菌感染鱼类细胞系和鱼体的能力下降;进而作为候选疫苗株,实现对柱状黄杆菌引发的柱形病的免疫防控。
本发明属于生物技术领域,具体公开了鳜干扰素诱导蛋白启动子和应用。本发明通过pro‑F和pro‑R为引物,以鳜肝脏和皮肤提取的总DNA为模板扩增得到该基因的启动子序列,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明构建了含有该干扰素诱导蛋白基因启动子的双荧光素酶报告质粒,此质粒可以被I型和II型干扰素显著激活,可作为阳性分子标记在干扰素系统研究中进行应用。
本发明属于分子生物学领域,公开了柱状黄杆菌VI型分泌系统效应分子及其免疫蛋白及应用。所述的柱状黄杆菌效应分子的序列为SEQ ID NO.2所示,所述的免疫蛋白为SEQ ID NO.4所示。申请人在此基础上提供了柱状黄杆菌竞争生长相关基因在细菌检测中的应用,基因缺失突变株的构建方法以及四株基因缺失突变株。还特别涉及利用这些基因缺失突变株,可以实现柱状黄杆菌与其他细菌共培养时,竞争生长能力下降;进而在构建候选疫苗株,通过在候选疫苗株中敲除这些细菌竞争生长必需基因,从而实现候选疫苗株在自然界中的自然清除。
本发明属于生物技术领域,具体公开了鳜鱼伽玛干扰素相关因子及其重组蛋白和应用,本发明通过设计兼并引物扩增得到IFN‑γrel基因片段,race的方法扩增得到完整基因序列,以IFN‑γrel‑ORF‑F和IFN‑γrel‑ORF‑R为引物,以鳜的头肾和肠混合组织总RNA为模板扩增得到IFN‑γrel基因的完整开放阅读框,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,对应编码的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的IFN‑γrel重组的蛋白经初步验证能够诱导免疫相关基因Mx,IRF1,STAT1以及SOCS1的上调表达,可作为鱼类免疫增强剂或者免疫佐剂。