本发明提供一种胶体金试纸及其制备方法和应用,涉及医用检测器械领域。该制备方法,包括以下步骤:制备抗原:采用293T细胞表达重组抗原RBD,重组抗原RBD氨基酸序列如SEQ ID No.1所示;制备抗原膜:用包被缓冲液包被抗原,在封闭液中浸泡,烘干;制备金标抗体:配制氯金酸溶液,加入柠檬酸三钠溶液,加热至液体呈亮红色,调节pH至7.3‑7.8,加入抗体,混匀,离心,清洗沉淀,用金标抗体保存液溶解;冻干:将金标抗体铺在玻璃纤维膜上,冷冻干燥;制备试纸板:将抗原膜、吸水纸、冻干金标抗体玻璃纤维膜贴在塑料底板上,即得胶体金试纸。本发明针对2019‑nCoV新型冠状病毒的特异性片段,得到重组抗原RBD,应用于胶体金试纸,可以降低检测假阳性,提高检测准确度和效率。