糖苷内切酶S2(endoglycosidase,EndoS2)突变体包含:野生型糖苷内切酶S2序列(SEQ ID NO:1)内的一或多个突变点,其中该一或多个突变点是位于残基133‑143、残基177‑182、残基184‑189、残基221‑231、及/或残基227‑237内的肽区域内。其中,相较于野生型糖苷内切酶S2,该糖苷内切酶S2突变体具有较低的水解活性以及较高的转糖苷化活性。一种使用糖苷内切酶S2突变体来制备一经糖工程改造的糖蛋白的方法,其包含将一活化寡糖耦合至一糖蛋白受体上。活化的寡糖为聚糖恶唑啉。