本发明属于分子检测领域，提供了环介导等温扩增技术检测猫胞裂虫的方法及其应用，设计合成专用引物，包括2条内引物FIP和BIP，2条外引物F3和B3，以待测的猫基因组DNA为模板，在专用引物的引导下进行LAMP扩增；取LAMP产物小心垂直加到加样孔中，对照Marker是DL2000DNA，用100V电泳电压，约30min，停止电泳，取出凝胶，于紫外凝胶成像系统中观察凝胶，观察有目的条带为阳性，没有目的条带为阴性；还可以将SYBR Green I加入到扩增产物中，在紫外光照射下，发出淡黄绿色荧光的为阳性，红橙色为阴性。本发明可以快速、准确的检测猫胞裂虫，CR高，并且耗时短、成本低、操作简单，便于临床上应用。
本发明属基因检测技术领域，涉及一种猫血巴尔通氏体SYBR Green I荧光PCR检测方法及引物，包括以下步骤：提取猫血液中全基因组DNA，设计引物，引物稀释，优化反应条件，绘制溶解度曲线，绘制标准曲线，检测特异性，测定变异系数，验证及结果分析。本发明检测方法优点在于建立了不用核酸探针即可检测的PCR技术，简单、快速、价格低廉，在一般的实验室即可实现，与传统的普通PCR方法相比较，这种方法无需对PCR产物进行凝胶电泳分析，可避免产物引起模板污染，而且可实时观察反应来判读结果，在一定程度上避免了传统PCR容易产生的假阳性结果。
本发明涉及一种荧光定量RT-PCR检测猪蓝耳病弱毒疫苗病毒含量的方法，属疫苗质量检测技术领域。该方法包括猪蓝耳病病弱毒疫苗病毒特异性引物设计、RNA提取、cDNA制备、实时荧光定量RT-PCR扩增、标准质粒构建及检测标准曲线建立、有效性验证和结果判定。外侧引物（SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2）用于构建标准质粒，内侧引物（SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4）用于样品检测，内侧引物扩增片段包含于外侧引物扩增片段之内，两对引物均能特异性扩增猪蓝耳病弱毒疫苗株病毒，扩增产物大小分别为287bp和130bp。本方法检测灵敏度高，检测时间短，能同时进行大批量的样本分析，具有良好的敏感性、特异性、重复性，适用于各品牌猪蓝耳病病毒弱毒疫苗病毒含量的测定。
本发明涉及一种荧光定量RT-PCR检测猪瘟兔化弱毒疫苗病毒含量的方法, 属疫苗质量监测技术领域。本发明方法包括特异性引物及Taqman荧光探针的设计、RNA提取、cDNA制备、标准质粒构建、Taqman荧光定量PCR检测标准曲线的建立、有效性验证和结果判定。设计合成了两对引物，均能特异性扩增猪瘟兔化弱毒病毒的cDNA，SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2扩增产物大小为197bp，用于构建标准浓度的质粒，SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4扩增产物大小为143bp，包含于前述扩增产物197bp之内,加入荧光探针SEQ ID NO.5用于Taqman荧光定量RT-PCR检测猪瘟兔化弱毒疫苗病毒含量。本发明方法检测灵敏度高，检测时间短，能同时进行大批量的样本分析，具有良好的敏感性、特异性、重复性，适用于各品牌猪瘟兔化弱毒疫苗病毒含量的测定。
