本发明涉及一种海洋来源的内切型硫酸软骨素硫酸酯酶及其编码基因与应用。所述内切型硫酸软骨素硫酸酯酶PB_3262分离自发光杆菌(Photobacterium sp.)QA16，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明中的硫酸软骨素硫酸酯酶PB_3262降解富含A unit的CS‑A底物时表现为内切酶降解模式，其独特的酶学特性可应用于特殊硫酸化程度的硫酸软骨素的定向修饰，亦可制备不同的硫酸化程度的硫酸软骨素寡糖，尤其是对A unit二糖降解活力极高，酶活力达到了165.75U/mg。
本发明涉及一种海洋来源的外切型硫酸软骨素硫酸酯酶及其编码基因与应用。所述外切型硫酸软骨素硫酸酯酶PB_3285分离自发光杆菌(Photobacterium sp.)QA16，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明中的硫酸软骨素硫酸酯酶PB_3285降解富含C unit的CS二糖及寡糖底物时表现为外切酶降解模式，且专一性地作用于底物的还原端。PB_3285作用底物的硫酸化模式广泛，对C unit、D unit和E unit二糖的降解活力分别为3.64、0.15、0.59mU/mg。
本发明涉及一种硫酸软骨素裂解酶及其编码基因与应用。本发明中的硫酸软骨素裂解酶enCSase，分离自发光杆菌(Photobacterium sp.)QA16，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明中的硫酸软骨素裂解酶enCSase是一种新型CSase ABC酶，对硫酸软骨素、硫酸皮肤素和透明质酸均有较高的酶活性，降解硫酸软骨素、硫酸皮肤素和透明质酸时为内切酶模式；可应用于硫酸软骨素寡糖、硫酸皮肤素寡糖和透明质酸寡糖的制备，在医药及食品等领域具有广阔的应用前景。
本发明属于酶工程技术领域，涉及一种褐藻胶裂解酶系及其应用。一种褐藻胶裂解酶系，包含内切酶AlyPB1和外切酶AlyPB2；所述内切酶AlyPB1氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；外切酶AlyPB2氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。该酶系可应用于生产生物乙醇。两种褐藻胶裂解酶具有良好的协同作用，当两种酶以1:1的酶活比混合时，单糖的生成量是单独的外切酶降解褐藻胶时的6‑8倍，大大提高了褐藻胶的糖化效率，为生物乙醇的生产提供了高效新颖的候选酶系。
本发明涉及一种产生多种单糖产物的内切型双功能褐藻胶裂解酶Aly2及其编码基因与应用。Aly2的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码Aly2的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明制备的基因工程重组蛋白质rAly2对褐藻胶、聚古罗糖醛酸、聚甘露糖醛酸的比活力分别为2025U/mg、3672U/mg和1324U/mg，因此是一种双功能酶。该酶是内切酶，在彻底降解褐藻胶多糖底物时，最终主产物是不饱和二糖和不饱和三糖；在降解不同的寡糖底物时，还能产生饱和型的M、G或不饱和型的Δ等多种单糖产物。此外，rAly2生化性质稳定，因此是一种潜在的工具酶，可应用于医药及食品等领域，具有广阔的应用前景。
