本发明属于细胞免疫治疗技术范畴,具体涉及一种过表达ATP5IF1基因的靶向CD19的CAR‑T细胞及其应用。具体的说,一方面,涉及一种融合基因,包括ATP5IF1基因和靶向CD19的嵌合抗原受体的编码基因,该融合基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1第2491位‑4338位所示。本发明还涉及一种慢病毒表达载体、一种重组慢病毒、一种过表达ATP5IF1基因的靶向CD19的CAR‑T细胞,经体内外实验表明,过表达ATP5IF1的靶向CD19的CAR‑T细胞(即CD19‑IF1‑CAR‑T细胞)能够特异性杀伤肿瘤细胞,增强抗B细胞恶性淋巴瘤疗效,明显延长荷瘤小鼠的生存期。