本公开涉及天冬氨酸酶突变体及其在生产氨基酸中的应用。具体来说,本公开涉及一种新的天冬氨酸酶突变体、重组多肽、多核苷酸、核酸构建体、重组表达载体、重组宿主细胞,以及生产氨基酸的方法。本公开的天冬氨酸酶突变体是在在对应于SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的至少第273和387位中的一个位置处发生突变的突变体。与SEQ IDNO:1所示序列的多肽相比,本发明公开的天冬氨酸酶突变体在高底物浓度、低pH、低反应温度的催化条件下仍具有高酶活的特点,可高效制备目标氨基酸或其盐或其多聚体,以提升其大规模工业化生产的价值。