本发明涉及一种全人源抗人红细胞RhD全分子IgG及其制备方法和应用。所述的全人源抗人红细胞RhD全分子IgG包括重链可变区和轻链可变区,其特征在于:该抗体轻链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO.3所示,重链可变区氨基酸序列为SEQ ID NO.4所示。本发明利用表型差异的红细胞筛选及富集可特异性表达抗人红细胞RhD抗原的B细胞,再通过单B细胞BCR区建库PCR测序分析获得配对的全人源抗RhD抗体轻、重链可变区基因序列,后采用基因工程抗体技术,在真核细胞中表达该全分子抗体。重组表达的全人源抗人红细胞RhD全分子抗体可有效识别人体红细胞表面RhD抗原,导致RhD阳性的红细胞发生凝集反应。