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[发明专利]重组猪流行性腹泻病毒感染性克隆的构建方法及其感染性克隆和应用-CN202310401917.1在审
发明人：陈振海;潘朔楠;牟春晓;陈密;包文斌 -专利权人：扬州大学
申请日： 2023-04-14 - 公布日： 2023-07-18 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明公开了重组猪流行性腹泻病毒感染性克隆的构建方法及其感染性克隆和应用，包括以下步骤：第一轮基因重组扩增打靶片段；电转化打靶片段得到阳性克隆；将得到的阳性克隆通过第二轮重组去掉酶切位点和抗性基因得到表达目的基因的PEDV感染性克隆。本发明建立了基于细菌人工染色体的PEDV反向遗传学系统，通过Red同源重组技术，在体外快速高效地编辑PEDV基因组，为研究病毒的分子生物学特性、致病机理以及开发基因工程疫苗提供有力的技术平台，该方法高效便捷、特异性强，为体外编辑PEDV基因组及其它病毒基因组提供了新的方法。
重组流行性腹泻病毒感染性克隆构建方法及其应用

[发明专利]猪源PIV5全长感染性克隆及其制备方法和应用-CN202110986944.0有效
发明人：陈振海;成赛鹏;牟春晓;吴慧光;潘朔楠 -专利权人：扬州大学
申请日： 2021-08-26 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： C12N15/45 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，涉及猪源副流感病毒5型(PIV5)全长感染性克隆及其制备方法和应用，本发明利用一株分离自中国湖北腹泻猪的PIV5毒株，构建出以细菌质粒为骨架的病毒感染性克隆pPIV5‑HuB/YC，并能成功拯救出病毒，这是国内首次构建猪源PIV5全长感染性克隆。同时，将EGFP基因插入PIV5感染性克隆病毒基因组中，成功拯救出能表达该绿色荧光蛋白的重组PIV5病毒。在此基础之上，将猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)的S基因替换EGFP基因，并成功拯救出能表达PDCoV S的重组PIV5病毒。本发明为深入开展PIV5的基础和应用研究提供了有效的平台，具有重要的科学应用价值。
猪源 piv5 全长感染性克隆及其制备方法应用