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[发明专利]磺胺类药物印迹仿生抗体-上转换荧光探针制备方法-CN202211076164.3在审
发明人： 汤轶伟;潘其迪;胡雪莲;王文秀;闫蓉芳;张富源;郭帅杰;李航棋 -专利权人：河北农业大学
申请日： 2022-09-05 - 公布日： 2022-11-25 - 主分类号： C09K11/85 文献下载
摘要：本发明涉及一种磺胺类药物印迹仿生抗体‑上转换荧光探针制备方法，该方法将二氧化硅包裹的UCNPs微球为稳定剂，然后以磺胺二甲基嘧啶为主要模板分子，磺胺甲基嘧啶为辅助模板分子，甲基丙烯酸为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂，通过Pickering乳液法聚合制备磺胺类药物印迹仿生抗体‑上转换荧光探针UCNPs@SiO2@MIP。制备的荧光探针以红外光为激发波长，抗基质干扰能力强，可对磺胺类药物实现广谱识别和检测。该制备方法简单，避免了表面活性剂的使用，降低了有机溶剂的用量，经济环保，对食品中磺胺类药物检测具有良好的应用前景。
磺胺类药物印迹仿生抗体转换荧光探针制备方法

[发明专利]一种利用荧光二肽纳米微球/核酸适配体检测恩诺沙星的方法-CN202110799453.5有效
发明人： 汤轶伟;闫蓉芳;温振华;王向红;张福源;刘卫华;张雪梅 -专利权人：河北农业大学
申请日： 2021-07-15 - 公布日： 2022-07-29 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明涉及一种利用荧光二肽纳米微球/核酸适配体检测恩诺沙星的方法，该方法具体步骤如下：(1)制备二肽荧光纳米微球；(2)合成二肽荧光纳米微球恩诺沙星核酸适配体互补链偶联物；(3)制备磁性Fe3O4微球；(4)合成磁性Fe3O4偶联恩诺沙星适配体偶联物；(5)待测样品与步骤(4)合成的Fe3O4‑Apt混合；(6)将步骤(2)中合成的DNPs‑cDNA与步骤(5)中Fe3O4‑Apt混合，测定上清液荧光强度，对照标准曲线，计算样品中恩诺沙星含量。本发明用于检测方法的二肽荧光纳米微球制备方法简单、环境友好、荧光信号稳定；检测方法灵敏度高、抗干扰能力强、应用前景巨大。
一种利用荧光二肽纳米核酸体检测恩诺沙星方法

[发明专利]纳米纤维素稳定的皮克林乳液喹乙醇印迹微球制备方法-CN202210398995.6在审
发明人： 汤轶伟;张美甜;闫蓉芳;孟贺;温振华;王文秀;胡雪莲 -专利权人：河北农业大学
申请日： 2022-04-16 - 公布日： 2022-07-12 - 主分类号： C08F222/14 文献下载
摘要：本发明涉及一种纳米纤维素稳定的皮克林乳液喹乙醇印迹微球制备方法，其目的是为提高现有喹乙醇印迹微球表面孔穴结构，改进其对目标物的吸附速率和重复利用性。该发明步骤如下：（1）制备分散有纳米纤维素的去离子为水相；（2）制备溶有模板分子、功能单体、交联剂、引发剂的油相；（3）形成乳液，制备喹乙醇印迹微球（MIP）。本发明制备的喹乙醇印迹微球具有丰富的孔穴结构，对目标物具有较快的吸附速率，优越的重复利用性，能满足食品安全快速检测的需要，应用潜力巨大。
纳米纤维素稳定皮克林乳液乙醇印迹制备方法

[发明专利]制备壳聚糖稳定的皮克林乳液及喹乙醇印迹微球的方法-CN202210399006.5在审
发明人： 汤轶伟;张美甜;闫蓉芳;孟贺;温振华;王文秀;胡雪莲;王向红;张富源 -专利权人：河北农业大学
申请日： 2022-04-16 - 公布日： 2022-07-08 - 主分类号： C08F222/14 文献下载
摘要：制备壳聚糖稳定的皮克林乳液及喹乙醇印迹微球的方法，以及该微球在动物源食品中喹乙醇及其代谢物提取、净化及富集中的应用。首次以壳聚糖作为皮克林乳液稳定剂制备了一种新型的水包油皮克林乳液，为壳聚糖在食品安全检测领域中的应用提供了一种新的借鉴。通过结合皮克林乳液技术与分子印迹技术制备了一种尺寸均匀、形貌规整、孔穴丰富、选择性好的喹乙醇印迹吸附材料。本发明中所用制备方法简单、成本低廉，制备的吸附材料适用于分离柱中的填充吸附材料，用于高效净化、富集食品中痕量残留的喹乙醇及其代谢物，应用前景巨大。
制备聚糖稳定皮克林乳液乙醇印迹方法

[发明专利]一种具有双重指示信号判断美国红鱼新鲜度的指示卡-CN201911396936.X有效
发明人：刘秀英;王昱;朱力杰;励建荣;李学鹏;高雪;汤轶伟;张德福 -专利权人：渤海大学
申请日： 2019-12-30 - 公布日： 2022-06-07 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：一种具有双重指示信号判断美国红鱼新鲜度的指示卡，包括指示标签、比色卡Ⅰ和比色卡Ⅱ，指示标签的制备步骤如下：首先制备聚苯胺，然后将聚苯胺均匀分散于四苯乙烯‑四氢呋喃溶液中，搅拌，离心分离，保留滤饼，将滤饼分散在无水乙醇中，得到聚苯胺/四苯乙烯复合物的分散液；将聚苯胺/四苯乙烯复合物的分散液超声分散，采用拉涂法将聚苯胺/四苯乙烯复合物的分散液涂布于聚酰胺膜表面，室温下干燥，获得指示标签。优点是：该美国红鱼新鲜度指示卡既具有荧光信号变化、又具有可见颜色变化的双重指示信号，检测结果准确可靠，灵敏度高，可以应用于美国红鱼新鲜度实时监测。
一种具有双重指示信号判断美国红鱼新鲜

[发明专利]一种基于聚苯乙烯纳米荧光微球探针检测氯霉素的方法-CN201910151183.X有效
发明人： 汤轶伟;陈金嫒;靳雨婷;任涛涛;李转英;高雪;刘秀英;励建荣;吕长鑫 -专利权人：渤海大学
申请日： 2019-02-28 - 公布日： 2021-11-30 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于聚苯乙烯纳米荧光微球探针检测氯霉素的方法，该方法步骤如下：（1）制备羧基修饰的聚苯乙烯纳米颗粒；（2）制备荧光聚苯乙烯纳米颗粒；（3）制备纳米微球‑氯霉素荧光探针；（4）氯霉素荧光试纸条构建和检测方法。（5）将氯霉素荧光探针加入到酶标板孔中；（6）将待测样品加入到步骤（5）中的酶标板的孔中；（7）向步骤（6）的酶标板孔中插入层析试纸条，得到检测结果。本发明提高了荧光探针的稳定性和灵敏度；本发明制备聚苯乙烯纳米荧光微球探针，不存在Eu(DBM)3phen泄露问题，构建的氯霉素荧光试纸条稳定性好，灵敏度高，具有巨大的商业应用价值。
一种基于聚苯乙烯纳米荧光探针检测氯霉素方法

[发明专利]一种基于量子点荧光微球探针检测氯霉素的方法-CN202110660260.1在审
发明人： 汤轶伟;刘欢;高雪;刘秀英;张福源;于志鹏;吕长鑫 -专利权人：渤海大学
申请日： 2021-06-15 - 公布日： 2021-09-07 - 主分类号： G01N33/53 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于量子点荧光微球探针检测氯霉素的方法，包括：(1)制备羧基化Mn‑ZnS量子点荧光纳米微球；(2)制备Mn‑ZnS量子点纳米微球‑氯霉素荧光探针；(3)氯霉素荧光试纸条构建和检测方法；(4)将步骤(2)的Mn‑ZnS量子点‑氯霉素荧光探针与待测样品混合滴加于样品垫上；(5)4‑5min后根据试纸条上的荧光强度得到检测结果。本发明提高了荧光探针的稳定性和灵敏度；一步合成的具有羧基和氨基修饰的Mn‑ZnS量子点，提高了该量子点在水相溶剂中的分散性和稳定性，增加了Mn‑ZnS量子点偶联氯霉素抗体后荧光探针的灵敏度和稳定性，氯霉素荧光试纸条稳定性好，灵敏度高，商业应用价值好。
一种基于量子荧光探针检测氯霉素方法

[发明专利]同时检测四种硝基呋喃类代谢物的荧光免疫层析试剂盒及其制备方法和应用-CN202110446512.0在审
发明人：刘秀英;程媛媛;励建荣;李学鹏;高雪;汤轶伟;林洪;郭晓华;王轰;于建洋;劳敏军 -专利权人：渤海大学
申请日： 2021-04-25 - 公布日： 2021-07-23 - 主分类号： G01N33/558 文献下载
摘要：本发明提供了同时检测四种硝基呋喃类代谢物的荧光免疫层析试剂盒及其制备方法和应用，属于抗生素检测技术领域，所述试剂盒包括层析试纸和量子点探针；所述层析试纸的硝酸纤维素膜上设置检测线T1、T2、T3、T4和质控线C；所述检测线T1、T2、T3、T4分别喷涂包被抗原2‑NPAOZ‑BSA、2‑NPAHD‑BSA、2‑NPSEM‑BSA和2‑NPAMOZ‑BSA；所述量子点探针包括红光量子点偶联的2‑NPAOZ抗体、黄光量子点偶联的2‑NPAHD抗体，绿光量子点偶联的2‑NPSEM抗体和橙光量子点偶联的2‑NPAMOZ抗体。本发明所述试剂盒，能够同时检测四种硝基呋喃类代谢物，灵敏度高。
同时检测硝基呋喃代谢物荧光免疫层析试剂盒及其制备方法应用

[发明专利]基于近红外激发的恩诺沙星荧光探针的制备方法-CN201710202125.6有效
发明人： 汤轶伟;张宏;刘秀英;高雪;李敏;张雨辰;励建荣 -专利权人：渤海大学
申请日： 2017-03-30 - 公布日： 2019-03-22 - 主分类号： C09K11/02 文献下载
摘要：本发明涉及一种基于近红外激发的恩诺沙星荧光探针的制备方法，步骤如下：（1）制备上转换NaYF₄:Er³⁺,Yb³⁺（UCP）微粒；（2）制备功能化NaYF₄:Er³⁺,Yb³⁺微粒；（3）制备近红外激发的恩诺沙星荧光探针UCP@MIP。本发明制备的恩诺沙星UCP@MIP荧光探针，不存在NaYF₄:Er³⁺,Yb³⁺泄露问题，该荧光探针对恩诺沙星有快的吸附速率；以近红外为激发光源可避免实际样品检测时基质的自发荧光干扰，适合复杂样品检测。
基于红外激发恩诺沙星荧光探针制备方法

[发明专利]检测食品中蜡样芽孢杆菌的含扩增内标的PCR方法及试剂盒-CN201510267524.1有效
发明人：励建荣;张德福;张明;付绪磊;汤轶伟;高雪;徐永霞;刘秀英;刘雪飞;赵丽红;李春 -专利权人：渤海大学
申请日： 2015-05-21 - 公布日： 2018-06-19 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明提供了一种检测食品中蜡样芽孢杆菌的有扩增内标的PCR方法及试剂盒，与现有方法相比，其优点是使用方便、可靠性好、检测周期短、灵敏度高、特异性强、成本低廉、操作步骤简单，适用于高通量操作、标准化操作，对提高食品安全具有重要意义。所述方法包括：(1)利用primer premier 6.0软件设计针对蜡样芽孢杆菌的一对特异性引物A/B和一对扩增内标引物C/D；(2)采集可疑样品进行增菌培养，提取DNA后，A/B和C/D两对引物、扩增内标模板、检测样品DNA共同进行扩增；(5)取试剂盒的PCR反应预混液配置25ul反应体系进行扩增，琼脂糖凝胶电泳后紫外灯下观察检测结果。 1
扩增蜡样芽孢杆菌试剂盒琼脂糖凝胶电泳特异性引物检测结果检测样品两对引物内标引物软件设计食品安全特异性强增菌培养重要意义提取DNA 高通量灵敏度预混液种检测紫外灯检测内标标准化采集观察配置

[发明专利]一种恩诺沙星适配体/分子印迹杂化型上转换荧光探针的制备方法-CN201610404506.8有效
发明人：刘秀英;朱力杰;汤轶伟;励建荣;高雪;张德福 -专利权人：渤海大学
申请日： 2016-06-08 - 公布日： 2017-11-10 - 主分类号： C08F220/06 文献下载
摘要：一种恩诺沙星适配体/分子印迹杂化型上转换荧光探针的制备方法，以Y2O3、Yb2O3和Tm2O3为原料，制备上转换发光材料，进行硅烷化修饰后，用亲和素进一步修饰，制备亲和素修饰的上转换发光材料，将生物素修饰的恩诺沙星适配体连接于亲和素修饰的上转换发光材料表面，制备恩诺沙星适配体修饰的上转换发光材料；最后均匀分散于致孔剂中，加入功能单体，加入交联剂和引发剂，制得恩诺沙星适配体/分子印迹杂化型上转换荧光探针。优点是该探针具有分子印迹聚合物和适配体协同增效的双重识别保障，识别能力更加高效、精准；不但可以用于目标物恩诺沙星的特异性识别和富集，还可以用于定量测定。
一种恩诺沙星适配体分子印迹杂化型上转换荧光探针制备方法

[发明专利]克伦特罗分子印迹‑上转换发光材料荧光探针的制备方法-CN201510144300.1有效
发明人： 汤轶伟;高子媛;高雪;高静纹;兰建兴;魏立巧;李译;励建荣 -专利权人：渤海大学
申请日： 2015-03-31 - 公布日： 2017-05-31 - 主分类号： C09K11/85 文献下载
摘要：本发明涉及一种克伦特罗分子印迹‑上转换发光材料荧光探针制备方法，是以上转换发光材料YF3Yb3+,Er3+为载体结合共价键法制备的克伦特罗分子印迹制备而成的新型荧光探针，该探针将分子印迹聚合物高特异识别性能和上转换发光材料荧光高灵敏性相结合，制备步骤如下首先制备上转换发光材料，然后制备克伦特罗分子印迹‑上转换发光材料荧光探针，最后洗脱克伦特罗分子。制备的荧光探针是以红外光作为激发波长，发射波长为可见光，灵敏度高，特异性强，干扰小。该制备方法简单，重现性好，对实际样品中克伦特罗的选择性识别和检测具有良好的应用前景。
克伦特罗分子印迹转换发光材料荧光探针制备方法

[发明专利]盐酸克伦特罗仿生免疫柱及其检测方法-CN201510029262.5有效
发明人： 汤轶伟;高子媛;励建荣;闫俊宇;兰建兴;魏立巧;李译;高静纹 -专利权人：渤海大学
申请日： 2015-01-21 - 公布日： 2017-02-22 - 主分类号： G01N33/535 文献下载
摘要：本发明公开了一种盐酸克伦特罗仿生免疫柱及其检测方法，该仿生免疫柱包括固相萃取柱、测试层、筛板、固相萃取小柱转接头和注射器；其检测步骤是活化，上样，洗柱，加入酶标记物，洗柱，显色。根据测试层的颜色深浅定性或半定量样品中的盐酸克伦特罗含量。该仿生免疫柱制备简单、操作方便、成本低廉、特异性好、不需要专业培训，检测结果清晰易辨别，易于推广，适宜现场检测。
盐酸克伦特罗仿生免疫及其检测方法

[发明专利]一种同时检测单增李斯特菌、蜡样芽孢杆菌、阪崎克罗诺杆菌和金黄色葡萄球菌的试剂盒-CN201610272863.3在审
发明人：张德福;励建荣;张明;方亚琴;李春;汤轶伟;高雪;徐永霞;白凤翎;付绪磊;赵禹宗 -专利权人：渤海大学
申请日： 2016-04-28 - 公布日： 2016-08-31 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：一种可同时检测单核细胞增多性李斯特菌、蜡样芽孢杆菌、阪崎克罗诺杆菌、金黄色葡萄球菌的一管多重扩增内标PCR试剂盒，该试剂盒包含：PCR反应预混液及对照品；检测方法是：首先采集样品，进行增菌培养，培养后提取DNA，制备PCR反应管，置于PCR仪上进行PCR扩增，得PCR扩增产物进行检测结果判定。优点是：该试剂盒一次反应可以同时快速检测上述四种细菌。与现有的检测方法相比，该方法使用方便、可靠性好、检测周期短、灵敏度高、特异性强、成本低廉、操作步骤简单，适用于高通量操作、标准化操作，而且可以指示因样品处理过程中存在聚合酶抑制因子及操作失误导致的假阴性结果，防止结果误判，有助于提高食品安全检测的水平及食源性疾病的预防和控制。
一种同时检测李斯特芽孢杆菌阪崎克罗诺金黄色葡萄球菌试剂盒

[发明专利]一种快速检测乳及乳制品中阪崎克罗诺杆菌的试剂盒-CN201610272895.3在审
发明人：张德福;励建荣;张明;方亚琴;李春;汤轶伟;高雪;刘秀英;白凤翎;赵禹宗 -专利权人：渤海大学
申请日： 2016-04-28 - 公布日： 2016-08-24 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：一种快速检测乳及乳制品中阪崎克罗诺杆菌的试剂盒，该试剂盒包含：无菌去离子水、PCR反应预混液、对照品；PCR反应预混液中除含有阪崎克罗诺杆菌的1对特异性引物外还含有1对原核生物16S rRNA基因序列的通用引物作为扩增内标。本试剂盒的使用方法是：首先采集样品，利用无菌营养肉汤培养基进行增菌培养，提取DNA备用；利用试剂盒中的材料制备包括空白阴性、阴性阴性、阳性对照和检测样品的PCR反应管，置于PCR仪上，根据说明书中的反应体系与反应条件进行扩增，扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，根据说明书判定结果。本试剂盒可以用于阪崎克罗诺杆菌的快速检测、流行病学调查等，其优点是与现有的检测方法相比，能够避免因样品或制备过程中存在DNA聚合酶抑制剂或操作失误使结果呈假阴性现象而导致的结果误判，对提高食品质量与安全及食品检测水平具有一定现实意义。
一种快速检测乳制品中阪崎克罗诺杆菌试剂盒

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