本发明涉及一种4×Tβ4基因以及在烟草中表达4×Tβ4蛋白的方法,该基因的碱基序列如SEQ ID NO.2所示,该方法包括如下步骤:将含有融合基因4×Tβ4的克隆载体质粒进行酶切,回收目标DNA片段,获得带有相应的粘性末端的目的基因4×Tβ4,然后将其克隆到烟草表达载体中,通过测序或酶切鉴定,在确保表达载体中的目的基因阅读框架正确的前提下,再将表达载体质粒用冻融法导入农杆菌中,获得工程菌;将灭菌后的烟草种子播于发苗培养基上,取生长两周的无菌叶片,作为外植体进行转化;提取4×Tβ4功能蛋白。本发明提供的融合蛋白4×Tβ4在皮肤和眼角膜伤口治愈和修复方面具有重要的生物活性和功能。
本发明涉及一种基因工程技术领域的诺如病毒P粒子基因PGENE以及在大肠杆菌中表达诺如病毒P粒子的方法,该基因序列为SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,并添加六个组氨酸(6×his)标签,在大肠杆菌中表达诺如病毒P粒子的方法包括:构建含pET32-PGENE基因的表达载体;转化大肠杆菌;pET32-PGENE活性蛋白的提取。本发明提供的P粒子的免疫原性要强于VLPs,而且P粒子结构稳定,该P粒子作为NVs口服亚基疫苗,在广泛预防Norovirus病毒感染上具有重要应用价值。