本发明涉及生物技术领域,具体公开了一种胞苷单磷酸激酶突变体及其基因和应用。所述胞苷单磷酸激酶突变体与SEQ ID NO:1具有至少90%的核苷酸序列一致性,且包含以下至少一个或多个位置的突变,所述的突变位点包括SEQ ID NO:1的第3、4、5、74、77、79、85、170或173位中的至少一个突变位点。本发明采用定点突变提高了胞苷单磷酸激酶的热稳定性,将热稳定性佳的胞苷单磷酸激酶突变体构建到菌株中,在3’‑唾液酸乳糖的酶催化合成中,提高了酶催化反应的速率和减少了酶活力的损失,使得可以获得更高产量的3’‑唾液酸乳糖,并进一步提升了底物的转化率,缩短了生产周期,降低了生产成本。