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[发明专利]一种去除血浆中儿茶酚胺及其中间代谢物的方法及应用-CN202110956832.0有效
发明人： 李姝妹;翟立斐;戴辉;徐忠斌;周建营;谢晓磊;张东丽;施燕萍;张璐 -专利权人：上海睿质科技有限公司
申请日： 2021-08-19 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： G01N30/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种去除血浆中儿茶酚胺及其中间代谢物的方法及应用。具体的说，本发明公开了一种去除血浆中肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、甲氧基肾上腺素(MN)、多巴胺(DA)、甲氧基去甲肾上腺素(NMN)和3甲氧基酪胺(3‑MT)的方法。本发明包括如下步骤：首先通过固相萃取装置、吸附剂、超滤管对血浆进行处理，最后通过液相色谱串联质谱法进行检测，比较不同的处理方式，对血浆中儿茶酚胺及其中间代谢物的影响，从而筛选出较优的处理方式，得到空白血浆基质。本发明得到的空白血浆基质制备方法，可用于血浆中儿茶酚胺及其中间代谢物检测系统、平台、检测装置或试剂盒中空白样本的制备生产与应用。
一种去除血浆儿茶酚胺及其中间代谢物方法应用

[发明专利]一种基于磁性吸附剂快速提取儿茶酚胺的方法-CN202111612913.5有效
发明人： 李姝妹;周建营;谢晓磊 -专利权人：上海睿质科技有限公司
申请日： 2021-12-27 - 公布日： 2023-07-21 - 主分类号： G01N30/06 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于磁性吸附剂快速提取儿茶酚胺的方法；所述方法包括：在待测样本中加入活化处理后的磁性弱阳离子交换吸附剂，震荡处理，移除溶液；淋洗得到的磁性弱阳离子吸附剂，移除淋洗溶液；加入洗脱液震荡处理。进一步对洗脱处理得到的溶液取样，进行LC‑MS/MS检测；根据标准曲线，比较目标化合物与内标物峰面积比，获得待测样本中目标化合物的浓度。本发明采用磁性弱阳离子交换吸附剂快速的提取血浆、尿液中的儿茶酚胺及其代谢物；提取过程可以在10min内完成；提取过程时间短，有效避免了因儿茶酚胺类物质易降解造成的困扰，为儿茶酚胺类物质的快速提取和检测提供实验方案。
一种基于磁性吸附剂快速提取儿茶酚胺方法

[发明专利]一种砀山酥梨遗传转化方法-CN201610076734.7有效
发明人：蔡永萍;程曦;金青;李姝妹;张金云;闫冲冲;马晨辉;程俊;孙宁 -专利权人：安徽农业大学
申请日： 2016-02-02 - 公布日： 2020-02-07 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：本发明一种砀山酥梨遗传转化方法，包括以下步骤：(1)遗传转化受体的建立；(2)农杆菌的培养及侵染液的配置；(3)侵染与共培养；(4)除菌培养与筛选培养；(5)抗性愈伤组织GUS染色鉴定。本发明以砀山酥梨愈伤组织为受体，以NptII为标记基因，以GUS基因为报告基因，通过农杆菌EHA105介导的方法进行砀山酥梨的遗传转化，获得阳性愈伤组织，然后即可通过阳性愈伤组织再分化为试管苗；本发明首先建立起一种以砀山酥梨当年生新稍为外植体诱导出愈伤组织，进而进行遗传转化的方法，砀山酥梨春季新稍酚类物质含量低，而且携带病菌量少，接种褐化率和污染率都很低，而且取材方便，愈伤组织诱导率高，能够满足遗传转化的需求。
一种砀山遗传转化方法

[发明专利]一种气质联用分离检测松柏醇和芥子醇的方法-CN201610921367.6有效
发明人：蔡永萍;李姝妹;金青;林毅;张金云;程曦;曹运鹏;余诚峰 -专利权人：安徽农业大学
申请日： 2016-10-21 - 公布日： 2018-12-18 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种气质联用分离检测松柏醇和芥子醇的方法，包括以下步骤：(1)将含有松柏醇和/或芥子醇的样品溶于色谱级吡啶中，得到样品溶液，然后对样品溶液进行衍生化处理，得待测样品；(2)对步骤(1)所得的待测样品使用气相色谱‑质谱联用技术进行分离检测。本发明应用气相色谱‑质谱联用的方法分离检测松柏醇和芥子醇，能够有效地分离检测松柏醇和芥子醇，并且确定了松柏醇保留时间和主要离子峰，以及芥子醇保留时间和主要离子峰，填补了NIST库中松柏醇和芥子醇衍生化后结构的空白，构建了松柏醇和芥子醇衍生化后GC‑MS检测质谱图，能够用来分离检测松柏醇和芥子醇，检测准确性高；且本发明工艺简单，容易实施，具有非常好的应用前景。
一种气质联用分离检测松柏醇和芥子方法

[发明专利]在8-9月份基于短截枝条获取外植体以提高砀山酥梨组培苗成活率的方法-CN201610189335.1有效
发明人：蔡永萍;张金云;程曦;金青;李姝妹;马晨辉;熊鹰;孙宁;闫冲冲;李国庆;程俊 -专利权人：安徽农业大学
申请日： 2016-03-28 - 公布日： 2018-08-21 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：一种在8‑9月份基于短截枝条获取外植体以提高砀山酥梨组培苗成活率的方法，该方法是在8‑9月份，选择树龄20年以内的梨树，并选择生长健壮无病虫害一年生的背上枝或徒长枝，在其芽体饱满充实处进行短截，诱发梨植株在剪口下萌发新梢，待新梢生长8㎝～10㎝时，剪下该新梢作为组培外植体；外植体经消毒、诱导培养、增殖分化培养、接穗培养和嫁接等步骤获得砀山酥梨种苗。本发明方法简单，操作容易，不增加其他成本；根据组培计划，需要多少外植体，就提前处理多少枝条。在8‑9月份可以通过本发明方法获得充足的砀山酥梨再生植株，满足利用基因工程进行种质改良研究或砀山酥梨规模化种苗繁殖等；且本发明组培方法成活率达96％以上。
月份基于枝条获取外植体提高砀山酥梨组培苗成活率方法

[发明专利]一种获取砀山酥梨外植体及提高组培苗成活率的方法-CN201610189333.2有效
发明人：张金云;蔡永萍;金青;程曦;马晨辉;李姝妹;程俊;闫冲冲;李国庆;孙宁 -专利权人：安徽农业大学
申请日： 2016-03-28 - 公布日： 2018-07-10 - 主分类号： A01G31/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种砀山酥梨外植体及提高组培苗成活率的方法，选择田间生长健壮、芽体饱满无病虫害的一年生中庸枝，通过人工培养获得5㎝‑10㎝的“新稍”，将其作为组培的外植体，然后再将该外植体经消毒及预处理、诱导培养、增殖分化培养、接穗培养和嫁接等步骤获得砀山酥梨种苗。本发明方法简单，充分利用冬季修剪去除的将丢弃的枝条。通过本发明人工方式获得大量“新稍”，提供组培所需足够的外植体，可进行砀山酥梨工厂化快速繁殖脱毒的优良种苗；且本发明组培方法成活率达96％。
外植体砀山酥梨组培成活率组培苗种苗预处理接穗冬季修剪分化培养快速繁殖人工方式人工培养诱导培养工厂化中庸枝枝条去除脱毒增殖病虫害丢弃嫁接消毒田间生长

[发明专利]在6-7月份基于新梢摘心获取外植体以提高砀山酥梨组培成活率的方法-CN201610189334.7有效
发明人：蔡永萍;张金云;金青;程曦;马晨辉;闫冲冲;李姝妹;程俊;孙宁;熊鹰;李国庆 -专利权人：安徽农业大学
申请日： 2016-03-28 - 公布日： 2018-07-03 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种在6‑7月份基于新梢摘心获取外植体以提高砀山酥梨组培成活率的方法，首先在6‑7月份，选择田间生长健壮无病虫害的一年生强旺新梢进行摘心，促使原新稍重新再诱发生长新的新梢，待新的新梢生长至10㎝～15㎝时，剪下该新稍即得组培外植体，然后再将外植体经消毒、诱导培养、增殖分化培养、接穗培养和嫁接等步骤获得砀山酥梨再生植株。本发明方法简单，操作容易，不增加其他成本。在6‑7月份也可以通过人工强摘心措施获得充足优良的组培外植体，培育出砀山酥梨再生植株，满足砀山酥梨规模化种苗繁殖或利用基因工程进行种质改良研究等；且本发明组培方法成活率达96％。
砀山酥梨外植体新梢组培摘心成活率再生植株生长接穗分化培养基因工程诱导培养种苗繁殖种质改良规模化剪下增殖病虫害嫁接消毒诱发田间培育研究

[发明专利]一种基于代谢组学鉴别霍山米斛与霍山铁皮石斛品种的方法-CN201610029560.9有效
发明人：金青;焦春燕;孙时伟;蔡永萍;林毅;宋程;李姝妹;王燕 -专利权人：安徽农业大学
申请日： 2016-01-15 - 公布日： 2017-09-26 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于代谢组学鉴别霍山米斛与霍山铁皮石斛品种的方法，具体步骤包括(1)石斛样品的采集；(2)石斛代谢组学样品的制备；(3)石斛样品代谢产物的检测；(4)代谢组学数据的处理与分析。本发明的优点在于采用代谢组学方法获得石斛大量的内源性代谢物信息，并从中筛选出鉴别霍山米斛与霍山铁皮石斛的特征性代谢产物，进而从整体上区别这两种石斛品种，技术方法先进、实验结果可靠，为石斛的品种鉴定和质量评价提供了一种优良方法。
一种基于代谢鉴别霍山铁皮石斛品种方法

[发明专利]一种筛选砀山酥梨适宜授粉梨品种的方法-CN201510962652.8在审
发明人：蔡永萍;杨君祎;程曦;闫冲冲;张金云;李姝妹;林毅;孙宁 -专利权人：安徽农业大学
申请日： 2015-12-16 - 公布日： 2016-03-16 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：一种筛选砀山酥梨适宜授粉梨品种的方法，具体步骤是：(1)提取授粉梨品种叶片的DNA；(2)进行SCoT-PCR反应，计算遗传相似系数，构建授粉梨品种之间的亲缘关系聚类图；(3)根据聚类分析结果，选取亲缘关系远、中、近的授粉品种树给砀山酥梨进行授粉；(4)对每个授粉品种所结成熟果实果肉组织的石细胞团数目及面积进行显微观察、计算；并测定石细胞含量；(5)通过步骤(4)的分析结果，筛选出最优亲缘关系授粉梨品种。本发明可以快速准确的从分子层面揭示不同梨品种资源间的亲缘关系，通过分析不同亲缘关系授粉品种对砀山酥梨果实石细胞大小及含量的影响，进而筛选出适宜亲缘关系的优良授粉品种，改善砀山酥梨果实的石细胞含量，提高砀山酥梨果实品质。
一种筛选砀山适宜授粉品种方法

[发明专利]一种用高效液相色谱法分离测定松柏醇和芥子醇含量的方法-CN201410605969.1有效
发明人：蔡永萍;李姝妹;闫冲冲;金青;林毅 -专利权人：安徽农业大学
申请日： 2014-10-30 - 公布日： 2015-04-22 - 主分类号： G01N30/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用高效液相色谱法分离检测松柏醇和芥子醇含量的方法。打破了常规用高相气相色谱测定松柏醇的方法，并且此方法可以同时检测松柏醇和芥子醇。另外可以实现和酸类物质在同一种条件下测定的方法，使实验数据更能说明问题。该方法采用C18柱，流动相为水和甲醇，体积流量为0.4-0.7mL/min，柱温为25-30℃，分析时间为70min，检测波长为275nm，进样量为20uL，能够有效的检测分离松柏醇和芥子醇，并且峰形较好，能够用来分离测定样品中松柏醇和芥子醇。
一种高效色谱分离测定松柏醇和芥子含量方法

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