本发明提供了一种鉴定黑牛肝菌YL1701‑2菌株单核体交配型的引物及方法,涉及生物技术领域,能够快速准确地鉴定YL1701‑2菌株单核体的交配型,从而提高基于YL1701‑2菌株的杂交育种工作效率。该引物包括第一引物对、第二引物对、第三引物对、第四引物对、第五引物对、第六引物对、第七引物对和第八引物对中的一对或多对,其中8对引物分别具有如序列表中SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.16所示序列。本发明主要通过使用上述8对引物或其中部分引物对待测单核体的基因组DNA模板进行PCR扩增,判断交配型基因A、B位点的基因型,从而判定该单核体的交配型。