一种酸性α淀粉酶及其制备方法与应用,属于生物工程技术领域。所述酸性α淀粉酶的核苷酸序列如SEQ ID NO 1,氨基酸序列如SEQ ID NO 2。酸性α淀粉酶的制备方法:1)设计并合成扩增酸性α淀粉酶基因的引物;2)PCR扩增及重组质粒的构建;3)α淀粉酶的表达与纯化所述酸性α酶可在纺织、造纸、洗涤剂、发酵和食品工业中的应用。所述α淀粉酶具有较广的pH与温度适用范围,不仅能用于淀粉糖化、生产高麦芽糖浆、生产高葡萄糖浆等淀粉加工工业,同时由于其在高温酸性条件下具有较高的酶活,还可在洗涤剂工业、医疗、食品和饲料加工方面进行应用,从而拓宽α淀粉酶在工业生产中的应用范围。