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- [发明专利]一种保持细胞应力平衡的固定方法-CN201410433243.4有效
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国前;于金明;廖湘鲁
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山东省肿瘤医院
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2014-08-28
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2018-09-14
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C12N11/08
- 本发明公开了一种保持细胞应力平衡的固定方法,取需要固定处理的分离细胞,PBS离心漂洗;将弃上清的细胞团加入PBS,混匀后将细胞悬液涂布于培养皿底部;将培养皿置于0℃,用254nm UV灯以1.84W/cm2强度照射,总剂量165.6J/cm2;将上述处理后的细胞用PBS冲洗收集于离心管中;收集的细胞经260g离心3‑8分钟,弃上清后,加入4%的多聚甲醛固定1‑6秒钟后终止固定。在保证细胞固定效果的同时,保持了细胞的应力平衡,使后期的试验结果更加的准确明显。固定在1‑6秒保证了仅使细胞膜表面的蛋白质变性铰链,而细胞内的蛋白还是处于原来的状态,若4%的多聚甲醛固定10秒以上,就使得细胞内的所有蛋白都处于铰链状态。
- 一种保持细胞应力平衡固定方法
- [发明专利]将细胞原位电泳与流式分析术结合的细胞固定方法-CN201410433182.1有效
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国前;于金明;廖湘鲁
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山东省肿瘤医院
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2014-08-28
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2018-01-05
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G01N27/447
- 本发明公开了一种将细胞原位电泳与流式分析术结合的细胞固定方法,取待检测的细胞团加入4%的多聚甲醛预固定1‑6秒钟,终止固定;将预固定后的细胞团中加入0.2%Triton X‑100 200μl进行细胞打孔5‑15分钟;将打孔后的细胞用PBS冲洗后,将冲洗后的细胞中加入电泳缓冲液制成细胞悬液;恒压条件下进行电泳,电泳完成后收集电泳缓冲液,将收集到的电泳缓冲液用70%的乙醇固定,固定22‑26h。本发明采用了二次固定的方法,第一次固定时使用4%的多聚甲醛预固定1‑6秒钟,使细胞膜的表面蛋白质变性,利于后续的打孔,保证细胞在打孔的过程中不破裂;若不进行第二次固定,细胞在进行后续的检测过程中会出现破裂,保证检测结果的准确性。
- 细胞原位电泳分析结合固定方法
- [发明专利]细胞接触抑制与边缘抑制效应观察池制作装置与方法-CN01135203.5无效
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国前;于金明;廖湘鲁;李敏;王兴武;魏玲;郑燕
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国前
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2001-11-30
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2002-06-19
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C12M3/00
- 细胞接触抑制与边缘抑制效应观察池制作装置与方法属于细胞培养器皿制造技术领域,装置由固定座、加热器、加热架、螺杆、螺杆架、螺杆转轮、转轮手柄、模具、固定螺母、夹紧螺钉、托板和玻璃片组成,使用时,将模具杆放入加热器端部螺口内并用夹紧螺钉紧固,将聚苯乙烯塑料片放在玻璃片上,使塑料片的中心正对模具,接通电源给模具加热后,旋进螺杆,使塑料片贴于模具端面,待塑料片与模具接触面熔化后,立即旋出螺杆,从加热器端部螺口取下模具,冷却后从模具上取下已制成的观察池,用本发明的装置和制作方法制作的观察池池底与池壁之夹角及池壁上缘角锐利、池底、池壁及池周表面光洁度高,且易于观察细胞生长接触抑制与边缘抑制效应。
- 细胞接触抑制边缘效应观察制作装置方法
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