本发明提供了一种呼吸道合胞病毒A/B亚型多重荧光定量PCR检测引物组和探针组及其试剂盒和制备方法。所述引物组序列如SEQ ID NO:1‑4所示,所述探针组序列如SEQ ID NO:5‑6所示。本发明还提供了一种呼吸道合胞病毒A/B亚型多重荧光定量PCR检测试剂盒,包括反应管、酶混合物、引物组和探针组,所述引物组的序列如SEQ ID NO:1‑4所示,所述探针组的序列如SEQ ID NO:5‑6所示。该引物组和探针组及其试剂盒能实现呼吸道合胞病毒A/B亚型的简便分型,具有特异性高、灵敏度高、快速、操作简单方便、成本低廉等多种优点。