本发明涉及快速检测家蚕微孢子虫的引物对及其试剂盒和检测方法,其引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示,利用该引物对在上、下游引物分别加入不同的核酸分子标记物,标记引物的PCR产物能够直接用免疫金试纸条判定,简化了操作步骤,方便,并且特异性好,灵敏度高,与传统的凝胶电泳相比,其敏感度增加10倍,是一种理想的家蚕成品卵中家蚕微孢子虫的检测手段,具有很好的应用前景。
本发明涉及一种特异性标记纳卡变形微孢子虫的核酸探针及其荧光原位杂交检测方法,其核酸探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;原位杂交具体步骤如下:取感染纳卡变形微孢子虫的家蚕寄生囊组织,进行固定后进行脱色处理,然后加入含所述核酸探针的杂交液进行杂交,杂交结束清洗,然后用DAPI对寄生囊的细胞核以及纳卡变形微孢子虫的细胞核进行标记,再用荧光显微镜,观测荧光探针标记结果;本发明的核酸探针与纳卡变形微孢子虫结合灵敏度高,具有更高的特异性,而且操作简便,结果更直观可靠,可以标记寄生囊中除成熟孢子以外的各发育阶段的病原。
本发明涉及一种特异性标记家蚕微孢子虫的核酸探针及其原位荧光杂交检测方法,特异性标记家蚕微孢子虫的核酸探针序列如SEQ ID NO1或SEQ ID NO2所示,进一步根据所需在其5’端或3’端结合上相应的荧光染料制备荧光探针;利用这种荧光探针提供荧光原位杂交方法检测感染家蚕微孢子虫的细胞。本发明提出的家蚕微孢子虫的特异性rDNA探针与家蚕微孢子虫结合灵敏度高,进一步结合荧光素做成的荧光探针比较使用抗体的荧光标记方法具有更高的特异性,而且操作简便,结果更直观可靠,可以标记除成熟孢子以外的各发育阶段的病原。