本发明涉及细菌性抗原技术领域,公开了铜绿假单胞菌疫苗重组蛋白reSBP‑ExoU及制备方法和应用,该疫苗重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明提供的重组蛋白reSBP‑ExoU由部分SBP蛋白(Ala22‑Phe260)和部分无毒ExoU突变体(Ser100‑Asn360,S142A和Asp344Ala)通过柔性Linker—GSGGSG分子融合连接而成,该重组蛋白reSBP‑ExoU不仅解决了reSBP蛋白与人体适用的佐剂吸附差、reExoU不稳定的问题,还具有较好的免疫原性和免疫保护效果,这对下一步开发铜绿假单胞菌疫苗等免疫调控手段具有重要的意义。
本发明属于细菌性抗原技术领域,公开了一种铜绿假单胞菌疫苗重组蛋白rePilA‑FliC及制备方法和应用,所述铜绿假单胞菌疫苗重组蛋白rePilA‑FliC的核苷酸序列为SEQ ID NO:1;氨基酸序列为SEQ ID NO:2;重组表达载体包含核苷酸序列SEQ ID NO:1。本发明采用pGEX‑6p‑2载体来构建重组表达质粒,表达重组蛋白rePilA‑FliC,pGEX是表达融合蛋白的载体,所表达的融合蛋白中含有一个蛋白纯化的GST标签。与其他融合载体相比,pGEX系列载体具有纯化条件温和、步骤简单、不需要变性剂的加入,从而使纯化后的蛋白能最大限度保持其空间构象和免疫原性。