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[发明专利]一种固定植物杂种优势的方法-CN201910307985.5有效
发明人：曹孟良;夏玉梅;詹祎捷;唐宁;卜小兰;余木兰;袁隆平 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2019-04-17 - 公布日： 2023-05-02 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明提供了一种诱导植物无融合生殖从而固定杂种优势的的方法。本发明将4个紧密连锁的基因表达盒转入杂交植物，包括：A、卵细胞或胚特异表达启动子驱动的致死基因表达盒E1；B、珠被等体细胞特异表达启动子驱动的胚发生基因表达盒E2；C、花粉特异表达启动子驱动的花粉失活基因表达盒E3；D、筛选标记基因表达盒E4。杂合转基因植物在自交结实过程中珠被体细胞形成胚，未携带转基因的精子与中央细胞结合形成胚乳，进而发育成种子；未携带转基因的卵细胞和精子正常受精而结实；而携带转基因的卵细胞败育，不能参与受精。本发明能使杂交种子的杂种优势得以固定，无需制种繁殖。
一种固定植物杂种优势方法

[发明专利]一种基于毒性解毒基因创制智能不育系的方法-CN201810939510.3有效
发明人：曹孟良;夏玉梅;唐宁;李丁;卜小兰;余木兰 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2018-08-17 - 公布日： 2022-08-09 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于毒性解毒基因创制作物智能不育系的方法。本发明以不育材料为研究对象，包括雄性不育材料和雌性不育材料，利用基因沉默技术，对野生型解毒基因进行操作，使解毒基因沉默。将解毒基因沉默、育性恢复基因和筛选标记基因3个连锁的表达盒构建载体，通过转基因技术转入隐性细胞核雄性/雌性不育系。获得智能雄性/雌性不育系，应用于雄性/雌性不育系的繁殖和杂交种的机械化制种。
一种基于毒性解毒基因创制智能不育方法

[发明专利]核酸分子、载体和细胞及其应用及通过无性胚和无胚种子高效筛选植物无融合生殖克隆种子-CN202011281000.5在审
发明人：曹孟良;夏玉梅;余木兰;唐宁;詹祎捷;淡俊豪;卜小兰;王耀;石跃斌 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2020-11-16 - 公布日： 2022-05-17 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明属于植物分子生物学和农业生物技术领域，具体涉及核核酸分子、载体和细胞及其应用以及通过无性胚和无胚种子高效筛选植物无融合生殖克隆种子，核酸分子包含表达盒E1，表达盒E1携带有产生MiMe突变体的元件及沉默BABY BOOM‑like基因的元件。筛选方法包括：将含有表达盒E1、E2和E3的核酸分子，或者含有该核酸分子重组载体导入植物；将所得转基因植物自交，获得带有筛选标记的无性胚种子和不带有筛选标记的无胚种子；通过筛选标记对无性胚种子和无胚种子进行分选，获得作为克隆种子的无性胚种子。本发明能够使转基因植物自交时获得无性胚种子和无胚种子，有利于无性胚种子的分选，从而可高比率的获得克隆种子。
核酸分子载体细胞及其应用通过无性种子高效筛选植物融合生殖克隆

[发明专利]核酸分子、载体、细胞和引物及其应用以及基于双重调控的植物高纯度克隆种子分选方法-CN202010962867.0在审
发明人：曹孟良;夏玉梅;余木兰;唐宁;詹祎捷;淡俊豪;卜小兰;王耀;石跃斌 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2020-09-14 - 公布日： 2022-03-15 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明属于植物分子生物学和农业生物技术领域，具体涉及核酸分子、载体、细胞和引物及其应用以及基于双重调控的植物高纯度克隆种子分选方法，包括：将受E2调控的携带有花粉致死基因的筛选标记基因表达盒E1；花粉特异性调控表达盒E2；胚自主发生基因表达盒E3，经孤雌生殖得不含筛选标记的无性胚；创制MiMe突变体的基因编辑表达盒E4同时导入植物。E2调控基因表达，删除E1中识别位点之间的元件，调控筛选标记基因的表达，获得带有筛选标记的活性花粉，当识别无效时，花粉致死基因表达，使不带有筛选标记的花粉失活。本发明能在杂种后代中高效分选出固定了杂种优势的种子，并达到杂种优势利用一系法的产业化要求。
核酸分子载体细胞引物及其应用以及基于双重调控植物纯度克隆种子分选方法

[发明专利]一种利用基因组编辑技术提高叶绿体遗传转化效率的方法-CN201811241495.1有效
发明人：曹孟良;唐宁;李丁;夏玉梅;石跃兵;卜小兰;余木兰;曹晨影;米微微;朱虹瑾 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2018-10-24 - 公布日： 2022-01-07 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用基因组编辑技术提高叶绿体遗传转化效率的方法，该方法利用基因组编辑技术，对叶绿体基因组进行定点剪切，提高外源基因在叶绿体基因组中的重组效率和整合效率，从而提高叶绿体遗传转化效率。
一种利用基因组编辑技术提高叶绿体遗传转化效率方法

[发明专利]一种固定植物杂种优势的种子分选方法-CN201910307717.3有效
发明人：曹孟良;夏玉梅;詹祎捷;唐宁;卜小兰;余木兰;袁隆平 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2019-04-17 - 公布日： 2020-06-05 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：一种固定植物杂种优势的种子分选方法。本发明提供了一种利用花粉特异性基因开关系统调控筛选标记基因，进而分选克隆种子，从而实现杂交种无融合体系应用的方法。本发明将3个紧密连锁的基因表达盒和MiMe敲除载体同时转入杂交植物，3个基因表达盒包括：1）卵细胞特异表达启动子驱动的胚自主发生基因表达盒E1；2）受E3调控的筛选标记基因表达盒E2；3）花粉特异性调控E2的表达盒E3。杂合转基因植物的自交结实种子中，除了经过孤雌生殖产生的固定了杂种优势的无性胚种子外，还包括授粉受精形成的合子胚种子，通过花粉特异性基因开关调控的筛选标记，这两种种子得以分选，克隆种子保留了杂种优势可用于生产，其余种子可用于商用。
一种固定植物杂种优势种子分选方法

[发明专利]一种利用基因组编辑技术快速创制适合机械化制种的工程雌性不育系的方法-CN201811388237.6在审
发明人：曹孟良;夏玉梅;唐宁;李丁;罗珊;卜小兰;余木兰 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2018-11-21 - 公布日： 2019-03-19 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明提供了一种利用基因组编辑技术快速创制适合机械化制种的工程雌性不育系的方法。本发明包括如下3个步骤：1）通过诱变技术或者基因编辑技术获得雌性不育突变体；2）将携带雌性可育基因、花粉致死基因和筛选标记基因3个基因表达盒的表达载体通过转基因技术转入受体材料，获得转基因材料；3）将雌性不育突变体与转基因材料通过杂交聚合选育出适合杂交种机械化制种的工程雌性不育恢复系。本发明能使与不育系播始期相同的优良恢复系快速转变为适合机械化制种的工程雌性不育恢复系。本发明在农业领域将具有广阔的应用和市场前景。
雌性不育制种机械化恢复系雌性不育系转基因材料基因组突变体杂交种筛选标记基因基因表达盒应用和市场转基因技术表达载体雌性可育技术获得农业领域受体材料致死基因基因不育系花粉诱变聚合杂交转入携带

[发明专利]除草剂敏感型恢复系在基于雌性不育的机械化制种中的应用-CN201811451540.6在审
发明人：曹孟良;唐宁;夏玉梅;李丁;石跃兵;卜小兰;余木兰;曹晨影;米微微;朱虹瑾 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2018-11-30 - 公布日： 2019-03-01 - 主分类号： A01H1/00 文献下载
摘要：本发明针对基于雌性不育的作物杂交种机械化制种技术，提出了一种雌性不育恢复系不育度不彻底的解决方法。利用除草剂敏感致死型雌性不育系作为恢复系亲本，应用于基于雌性不育的杂交种机械化制种中，生产的杂交种在苗期可以通过喷施相应除草剂保证作物杂交种的纯度。本发明在农业领域将具有广阔的应用和市场前景。
杂交种雌性不育除草剂恢复系机械化制种雌性不育系应用和市场农业领域制种技术敏感不育度喷施亲本应用致死保证生产

[发明专利]一种利用基因诱导调控系统的作物抗穗萌方法-CN201811388215.X在审
发明人：曹孟良;夏玉梅;唐宁;李丁;罗珊;余木兰;卜小兰 -专利权人：湖南杂交水稻研究中心
申请日： 2018-11-21 - 公布日： 2019-03-01 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用基因诱导调控系统的作物抗穗萌方法。所述方法是构建基因诱导调控系统，所述基因诱导调控系统可诱导调控地沉默种子发芽必须基因；无诱导物时，种子不能发芽，不出现穗萌现象；有诱导物时，种子发芽。这一方法彻底解决了种子的穗萌难题，又便于播种时顺利发芽。
发芽诱导调控调控系统基因诱导利用基因诱导物构建播种基因

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