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[发明专利]杂交瘤细胞株、抗孔雀石绿单克隆抗体和孔雀石绿检测方法及应用和产品-CN201711426285.5有效
发明人：宋革;郑巨燕;倪跃群;姚斌蕾;过钱烨惠;胡雅敏 -专利权人：杭州华安生物技术有限公司
申请日： 2017-12-25 - 公布日： 2020-12-04 - 主分类号： C12N5/12 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，具体而言，提供了一种杂交瘤细胞株、抗孔雀石绿单克隆抗体和孔雀石绿检测方法及应用和产品。本发明提供的产生抗孔雀石绿单克隆抗体的杂交瘤细胞株HAmJ0416 Eo‑A4，保藏号为CGMCC No.14890，该杂交瘤细胞株可以分泌大量的抗孔雀石绿单克隆抗体，细胞稳定性和持续性好，分泌的单克隆抗体特异性好。本发明提供的抗孔雀石绿单克隆抗体效价高，特异性好，成本较低，用生物素标记后可以大幅度提高检测灵敏度。本发明提供的孔雀石绿检测方法，检测成本较低，灵敏度高。本发明提供的孔雀石绿检测产品，包括试剂盒或试纸，生产成本低，操作简便，可快速准确得到结果，可以有效性的实现现场检测。
杂交瘤细胞株孔雀石单克隆抗体检测方法应用产品

[发明专利]检测植物感染番茄黄化曲叶病毒的dot-ELISA和组织印迹ELISA方法及其试剂盒及应用-CN201210426227.3无效
发明人：谢艳;周雪平;吴建祥;矫晓阳;倪跃群 -专利权人：浙江大学
申请日： 2012-10-30 - 公布日： 2013-02-13 - 主分类号： G01N33/577 文献下载
摘要：本发明公开了检测植物感染番茄黄化曲叶病毒的dot-ELISA和组织印迹ELISA方法及其试剂盒及应用。利用针对番茄黄化曲叶病毒外壳蛋白制备的单克隆抗体，建立配比最优化的斑点酶联免疫吸附法（dotenzyme-linkedimmunosorbentassay，dot-ELISA）及组织印记ELISA的方法，并研发快速检测试剂盒。该发明适用于番茄、辣椒、茄子、烟草、龙葵、曼陀罗等茄科植物。利用该发明可对田间蔬菜样品番茄黄化曲叶病毒感染情况进行调查，检测病毒病的发病率，评估番茄黄化曲叶病毒在田间的发生分布情况及流行爆发趋势。该检测方法灵敏度高、特异性好、耗时短、成本低，为番茄黄化曲叶病毒的快速、大规模检测提供技术支撑。
检测植物感染番茄黄化病毒 dot elisa 组织印迹方法及其试剂盒应用

[发明专利]一种携带南方水稻黑条矮缩病毒的白背飞虱的获得方法及其应用-CN201210052603.7无效
发明人：周雪平;吴建祥;刘欢;徐毅;周文武;饶黎霞;倪跃群;祝增荣 -专利权人：浙江大学
申请日： 2012-03-02 - 公布日： 2012-08-15 - 主分类号： A01K67/033 文献下载
摘要：本发明公开了一种携带南方水稻黑条矮缩病毒的白背飞虱的获得方法及其应用。利用感染南方水稻黑条矮缩病毒的水稻或者冷冻保存的水稻病株饲喂白背飞虱，使白背飞虱获得SRBSDV，之后将带毒的白背飞虱转移至健康水稻上饲喂，直到渡过病毒的循回期，然后利用RT-PCR技术和血清学方法对白背飞虱进行检测，获得携带SRBSDV的白背飞虱，实验证明人工饲喂可使白背飞虱带毒率达50%以上。利用该发明获得的携带SRBSDV的白背飞虱可用于抗SRBSDV单抗的筛选，进行水稻接种实验鉴定水稻的抗性，筛选抗病品种，为抗病育种服务。本发明还可用于研究SRBSDV与媒介昆虫白背飞虱之间的互作关系，为更好的防治该病毒提供有力的理论依据。
一种携带南方水稻黑条矮缩病毒白背飞虱获得方法及其应用

[发明专利]携带水稻齿叶矮缩病毒的褐飞虱的获得方法及其应用-CN201210052582.9无效
发明人：吴建祥;周雪平;倪跃群;徐毅;刘欢;周文武;饶黎霞;祝增荣 -专利权人：浙江大学
申请日： 2012-03-02 - 公布日： 2012-07-18 - 主分类号： A01K67/033 文献下载
摘要：本发明公开了携带水稻齿叶矮缩病毒的褐飞虱的获得方法及其应用。利用感染RRSV的水稻活体植株或者冷冻保存的水稻病样饲喂褐飞虱，使其获得水稻齿叶矮缩病毒，再将褐飞虱移至不带毒的健康水稻叶片上饲喂，直至渡过病毒的循回期而获毒。本发明获得的带毒褐飞虱可用于筛选抗RRSV的高灵敏度、高特异性的单抗，从而为该病毒病的预警预报，科学防控该病毒病提供物质和技术手段。同时，本发明专利获得的携带RRSV的褐飞虱可进行水稻接种实验鉴定水稻品种的抗性，筛选抗病品种，并为抗病育种服务。另外，本发明获得的携带RRSV褐飞虱为RRSV与褐飞虱介体间的互作及其传毒机理等的研究提供物质基础。
携带水稻齿叶矮缩病毒褐飞虱获得方法及其应用

[发明专利]分泌抗南方水稻黑条矮缩病毒单抗杂交瘤细胞株及其单抗应用-CN201210004180.1有效
发明人：周雪平;吴建祥;倪跃群;刘欢;饶黎霞 -专利权人：浙江大学
申请日： 2012-01-09 - 公布日： 2012-07-11 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种分泌抗南方水稻黑条矮缩病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其单抗的应用。用与牛血清白蛋白偶联的南方水稻黑条矮缩病毒（SRBSDV）的衣壳蛋白的C端12个氨基酸的多肽为抗原免疫BALB/c小鼠，经细胞融合、筛选、克隆，获得1株能稳定传代并分泌抗SRBSDV单抗的杂交瘤细胞株3F1，其保藏号为CGMCCNo.5535。3F1单克隆抗体腹水间接ELISA效价达10-6以上，抗体类型及亚类为IgG1，kappa链。该株单抗与SRBSDV56kD的外壳蛋白亚基有特异反应。利用3F1单抗建立的检测稻飞虱和水稻中SRBSDV的dot-ELISA检测方法，当单头白背飞虱稀释到6400µL时，病叶1:320倍稀释(w/v,g/mL)时仍能检测到病毒。抗SRBSDV单抗的制备及其检测方法的建立为该水稻病毒病的诊断、预报及科学防控提供技术和物质支撑。
分泌南方水稻黑条矮缩病毒杂交瘤细胞株及其应用

[发明专利]分泌抗水稻黑条矮缩病毒单抗杂交瘤细胞株及其单抗应用-CN201210004164.2有效
发明人：吴建祥;周雪平;倪跃群;刘欢;饶黎霞 -专利权人：浙江大学
申请日： 2012-01-09 - 公布日： 2012-07-04 - 主分类号： C12N5/20 文献下载
摘要：本发明公开了一种分泌抗水稻黑条矮缩病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株及其单抗的应用。用原核表达的方法表达水稻黑条矮缩病毒（RBSDV）的外壳蛋白CP为抗原免疫BALB/c小鼠，经细胞融合、筛选、克隆，获得1株能稳定传代并分泌抗RBSDV单克隆抗体（MAb）的杂交瘤细胞株5G1，其保藏号为CGMCCNo.5537。5G1单克隆抗体腹水间接ELISA效价达10-6以上，抗体类型及亚类为IgG1，kappa链。该株细胞分泌的单抗与RBSDV的外壳蛋白有特异免疫结合反应。利用5G1单抗为核心建立的检测稻飞虱和水稻中RBSDV的dot-ELISA检测方法，当单头灰飞虱稀释到1600µL时，病叶1:160倍稀释(w/v,g/mL)时仍能检测到病毒。抗RBSDV单抗的制备及其检测方法的建立为该水稻病毒病的诊断、预报及科学防控提供技术和物质支撑。
分泌水稻黑条矮缩病毒杂交瘤细胞株及其应用