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[发明专利]一种高效快速鉴定柑橘多胚品种有性胚的方法-CN202211292040.9有效
发明人：解凯东;谢善鹏;张艺;陈昊;伍小萌;郭文武 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2022-10-21 - 公布日： 2023-08-25 - 主分类号： A01H1/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种高效快速鉴定柑橘多胚品种有性胚的方法，属于柑橘生物育种技术领域。本发明的方法包括如下步骤：1)成熟种子准备：从柑橘多胚品种成熟果实中剥取出种子，并剥去除种子的内外种皮；2)有性胚的鉴定：观察种胚颜色，若既有白色又有绿色，则统计每粒种子白胚和绿胚数量。若白胚仅1个、绿胚有多个(1白+多绿)，则白胚为有性胚；反之，若绿胚仅1个、白胚有多个(1绿+多白)，则绿胚为有性胚。本发明依据种胚颜色鉴定柑橘多胚品种的有性胚，方法简便易操作，准确率高，节约了时间和劳力的投入，可提高以多胚柑橘品种为母本有性杂交的育种效率。
一种高效快速鉴定柑橘品种有性方法

[发明专利]一种基于柑橘原生质体的高效检测蛋白质亚细胞定位方法-CN201911042777.3有效
发明人： 伍小萌;杨雯惠;刘丹;王鹏蔚;郭文武 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2019-10-30 - 公布日： 2021-08-31 - 主分类号： C12Q1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于柑橘原生质体高效检测蛋白质亚细胞定位方法，包括以下步骤：(1)将细胞器荧光蛋白标记载体转化农杆菌，得到重组农杆菌；(2)重组农杆菌侵染柑橘外植体，获得表达细胞器荧光蛋白标记的柑橘材料；(3)将待测基因克隆到荧光不同于步骤(1)的荧光标记表达载体，获得待测基因荧光标记载体；(4)酶解步骤(2)得到的柑橘材料，分离纯化并获得表达细胞器荧光蛋白标记的柑橘原生质体；(5)通过PEG介导，将待测基因荧光标记载体转化步骤(4)获得的柑橘原生质体，培养24‑48h后，激光共聚焦显微镜下观察，两种荧光蛋白标记重合则表明待测基因表达蛋白定位于该细胞器。本发明方法简单、便捷、高效、成本低，成功率大幅提高。
一种基于柑橘原生质体高效检测蛋白质细胞定位方法

[发明专利]柑橘线粒体InDel分子标记及其应用-CN201911042998.0有效
发明人：郭文武;李超超;张帅;解凯东;伍小萌;徐强;邓秀新 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2019-10-30 - 公布日： 2021-07-16 - 主分类号： C12Q1/6895 文献下载
摘要：本发明公开了一组柑橘线粒体InDel分子标记及其应用，属于植物分子标记辅助种质资源鉴定技术领域。本发明的5对柑橘线粒体InDel分子标记引物序列如SEQ ID NO.1‑10所示，使用本发明的分子标记引物能够可快速、准确鉴定橘属、枳属和山金柑种质，能够鉴定柑橘原生质体融合后代线粒体来源，能够分析亲本未知柑橘品种母本来源。本发明在保护和利用野生柑橘资源上具重要意义。
柑橘线粒体 indel 分子标记及其应用

[发明专利]一种快速发掘柑橘四倍体的方法-CN201910767573.X在审
发明人：解凯东;周锐;伍小萌;郭文武 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2019-08-20 - 公布日： 2019-11-12 - 主分类号： A01H1/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种快速发掘柑橘四倍体的方法，属于植物多倍体育种技术领域。本发明方法根据柑橘根系、叶片和油胞的形态特征筛选疑似四倍体，与二倍体相比，四倍体的根系短粗、侧根少，四倍体的叶片厚、宽、颜色深，四倍体的油胞大、密度低；筛选疑似四倍体再用流式细胞仪进行倍性鉴定。本发明结合对根、叶和油胞的形态特征进行初选，获得四倍体的准确率可达85％以上，且用时短、操作简单；通过本发明方法获得的四倍体植株倍性稳定，不存在嵌合体。
四倍体柑橘形态特征根系叶片侧根筛选流式细胞仪四倍体植株植物多倍体倍性鉴定育种技术二倍体嵌合体准确率倍性用时初选