本发明涉及一种蛛丝蛋白的设计合成方法和纺丝；将E.australis蜘蛛MaSp1蛋白的高溶解度和pH敏感的N端结构域、A.ventricosus蜘蛛的MiSp蛋白的高溶解度和pH敏感的C端结构域和C.moluccensis来源的核心域模块组装溶解度高、pH敏感的蜘蛛丝蛋白，其氨基酸序列为SEQ ID NO.4所示。采用亲和层析法或尿素溶解法分离纯化获得目标蛋白，并制备高浓度且均匀透明的纺丝原液，利用湿法纺丝法将纺丝原液注入凝固浴中直接成丝，由于蛛丝蛋白的高pH敏感性使其可在pH2‑pH11较广的范围内成丝。
本发明涉及一种具有粘附‑抗污双功能的贻贝粘附蛋白/两性离子多肽融合蛋白及合成方法，将理性设计的融合蛋白基因克隆到质粒载体得到重组表达质粒，进一步转化宿主细胞后用诱导剂诱导宿主细胞过量表达融合蛋白，分离纯化后得到融合蛋白。所述贻贝粘附蛋白包含SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4或SEQ ID NO.5所示序列。所述两性离子多肽包含SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.8或SEQ ID NO.9所示序列。实现了微生物一步法合成粘附‑抗污双功能融合蛋白，该过程温和高效，成本低廉，设备要求度低，易于后期扩大生产。
本发明涉及一种基于贻贝粘附蛋白/两性离子多肽的三嵌段多功能融合蛋白的合成方法及应用，将融合蛋白的基因克隆到质粒载体得到重组表达质粒，转化宿主细胞后用诱导剂诱导宿主细胞过量表达融合蛋白，分离纯化后得到融合蛋白。所述的贻贝粘附蛋白包含SEQ ID NO.1、2、3、4或5所示的序列。所述的两性离子多肽包含SEQ ID NO.6、7、8或9所示的序列。所述第三嵌段多肽包含SEQ ID NO.10(RGD短肽)、11(SDE三肽)、12(IKVAV短肽)或13(RADA16‐I自组装多肽)所示的序列。实现了微生物一步法合成融合蛋白，该过程温和高效，成本低廉，设备要求度低，易于后期扩大生产。
