本发明公开了用于扩增影响鸡羽速性状的miRNA的特异性引物、其检测试剂盒和应用,所述特异性引物序列为SEQ ID NO.4所示。本发明还公开了检测试剂盒及其应用和检测方法。本发明首次研究获得了影响鸡羽速性状的miRNA,本发明提供的Novel‑miR‑33可用于开发鸡羽速性状的辅助选择标记,同时用于研究miRNA在鸡羽速性状中的调控机制及信号通路;并且同时基于该miRNA研究获得了检测该miRNA表达量的特异性引物,并研发获得了检测试剂盒。本发明提供的检测试剂盒可用于检测Novel‑miR33在鸡皮肤组织中的表达量,筛选或选育不同羽速性状的群体,检测方法简单快捷、准确可靠。