本发明涉及基因检测技术领域,具体涉及了一种扩张型心肌病变异基因RBM20,与野生型RBM20基因的参考序列SEQ ID NO:5相比,所述变异基因RBM20第2729位的碱基C突变为碱基T,核苷酸序列为SEQ ID NO:1。本发明还涉及上述扩张型心肌病变异基因RBM20在制备检测试剂盒中的应用。本发明提供的扩张型心肌病变异基因RBM20可以作为临床辅助诊断的生物标志物;检测该变异的携带者,为受试者提供优生优育指导和遗传咨询,减少患儿出生,对扩张型心肌病的早期诊断,或者辅助临床判断具有重要意义。