本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种自分泌IL‑21的NKL‑IL21细胞系及其构建方法和应用。自分泌IL‑21的NKL‑IL21细胞系的构建方法,包括以下步骤:S1、使用内切酶酶切核酸序列如SEQ ID NO.1所示的hIL‑21基因片段和慢病毒载体,通过连接酶将酶切后的hIL‑21基因和慢病毒载体连接,获得目的质粒;S2、使用磷酸钙转染法将目的质粒与包装质粒转染至细胞中,培养后收取病毒液并浓缩纯化;S3、使用浓缩纯化后的病毒液感染NKL细胞,将感染的NKL细胞进行扩增,得到NKL‑IL21细胞系。为解决外源性添加IL‑21的缺陷,本发明构建了人IL‑21(hIL‑21)基因修饰的NKL细胞系NKL‑IL21,以探究修饰之后自分泌的IL‑21对NKL细胞的作用以及作用机制,建立一种抗肿瘤作用更强的NK细胞系,并为克服肿瘤微环境、提高过继转输NK细胞的疗效提供新的思路。
本发明属于生物医药技术领域,涉及一种治疗或者预防乙肝病毒的疫苗。其mRNA包括I)~IV)中至少一种:I)、具有如SEQ ID NO.1~3任一所示核苷酸序列的核酸;II)、在I)所述核酸的序列中取代、缺失或添加一个或多个核苷酸的核酸;III)、与I)所述核酸的序列具有至少70%同源性的序列且编码乙肝病毒表面抗原的核酸;IV)、与I)~III)中任一项部分互补或完全互补的核酸。本发明提供的疫苗能够起到治疗乙肝的效果,实现乙肝的功能性治愈;同时可以起到预防乙肝的作用,克服目前传统乙肝疫苗对成人免疫应答低的难题。