本发明公开了一种CRISPR‑Cas9靶向敲除人SMYD3基因的方法及SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的sgRNA，所述sgRNA在人SMYD3基因上的靶位点位于基因的第二个外显子区域，靶序列唯一。本发明利用含有Cas9蛋白和上述sgRNA的CRISPR‑Cas9系统靶向敲除人SMYD3基因，以构建SMDY3基因敲除的细胞模型，以及制备预防和/或治疗肿瘤细胞的药物。
本发明涉及生物医药领域，具体为一种抑制人口腔癌细胞PRPS2表达的shRNA及其载体的构建和应用，本发明提供了一种抑制人口腔癌细胞PRPS2表达的shRNA，如SEQ ID NO.1，靶序列如SEQ ID NO：2，该shRNA通过如SEQ ID NO.3所示的DNA模板序列转录生成，将模板序列与线性化载体重组后，再与hTERT启动子序列重组，获得抑制人口腔癌细胞PRPS2表达的shRNA真核表达质粒；经验证，真核表达质粒载体在人DOK细胞和KB细胞中能稳定持续的降低PRPS2mRNA和蛋白表达水平，导致细胞增殖抑制、细胞周期阻遏、凋亡发生，克服了体外化学合成siRNA的作用时间短、毒性大等缺点。
